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MDA-MB-415
Tecido
Glândula mamária, peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
MDA-MB415, MDAMB415, MDA-415, MDA415, MD Anderson-Metastatic Breast-415

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MDA-MB-415

Cell line · Número do produto 305129

The MDA-MB-415 cell line is derived from a metastatic site of an adult female patient with breast adenocarcinoma. These cells are epithelial in nature and...

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha de células MDA-MB-415 é derivada de um local metastático de uma doente adulta com adenocarcinoma da mama. Estas células são de natureza epitelial e apresentam caraterísticas típicas das células epiteliais da glândula mamária. São conhecidas pela sua utilidade no estudo dos mecanismos moleculares e celulares subjacentes ao cancro da mama, incluindo a atividade dos receptores hormonais e os perfis de expressão genética. A linha celular MDA-MB-415 é positiva para o recetor de estrogénio (ER+) e negativa para HER2, o que a torna particularmente valiosa para a investigação centrada nos cancros da mama responsivos a hormonas. Os investigadores utilizam estas células para investigar o papel da sinalização do estrogénio na progressão do cancro da mama e para avaliar a eficácia das terapias anti-estrogénio.

Em termos de caraterísticas de crescimento, as células MDA-MB-415 crescem como monocamadas aderentes e requerem um meio de cultura rico em nutrientes para manter um crescimento e uma viabilidade óptimos. Estas células apresentam um tempo de duplicação moderado, o que as torna adequadas para vários ensaios in vitro, incluindo estudos de proliferação, apoptose e sensibilidade a medicamentos. O perfil genético das células MDA-MB-415 foi amplamente caracterizado, revelando mutações-chave e padrões de expressão genética que são relevantes para a biologia do cancro da mama. Esta linha celular constitui um modelo essencial para a compreensão das interações complexas entre as células cancerosas e o seu microambiente, contribuindo para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.

Tecido
Glândula mamária, peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • MDA-MB415
  • MDAMB415
  • MDA-415
  • MDA415
  • MD Anderson-Metastatic Breast-415

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Não

04Identificadores

Referência
MDA-MB-415 (número de catálogo da Cytion 305129)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0621

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Amelogenina (cromossoma x) (Amelex)
Expressão do antígeno
Tipo de sangue O

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
38 anos
Etnia
Europeu