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Células MDA-MB-435S
Tecido
Pele
Doença
Melanoma amelanótico
Local da metástase
Nádega direita, hipoderme (melanoma primário/origem M14)
Sinónimos
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Documentos

Células MDA-MB-435S

Cell line · Número do produto 300277

Aviso: A linha celular em questão foi identificada como problemática devido a problemas de contaminação. Mais concretamente, a linha celular original (MDA-MB-4...

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01Informações gerais

Descrição

Declaração de exoneração de responsabilidade: A linha celular em questão foi identificada como problemática devido a questões de contaminação. Especificamente, foi demonstrado que a linha de células-mãe (MDA-MB-435) é um derivado da linha de células M14.

A linha de células MDA-MB-435S é um modelo amplamente utilizado na investigação do cancro, que se pensava ser originalmente derivado de uma metástase de cancro da mama. Estas células apresentam caraterísticas típicas de células cancerígenas altamente agressivas, incluindo uma taxa de proliferação rápida, resistência à apoptose e a capacidade de invadir os tecidos circundantes. Devido a estas caraterísticas, as células MDA-MB-435S são frequentemente utilizadas em estudos que investigam as metástases do cancro, os mecanismos de resistência aos medicamentos e os fundamentos moleculares do comportamento agressivo dos tumores.

Curiosamente, análises moleculares e genéticas subsequentes revelaram que as células MDA-MB-435S partilham um perfil genético mais próximo do melanoma do que do cancro da mama, o que levanta implicações significativas para a sua utilização na investigação. Apesar desta controvérsia, continuam a ser um modelo valioso para estudar os processos metastáticos e testar potenciais agentes terapêuticos, em especial os que visam mecanismos comuns ao cancro da mama e ao melanoma. Os investigadores são aconselhados a ter em conta estas descobertas genéticas ao interpretarem os resultados obtidos em estudos que envolvam células MDA-MB-435S.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma amelanótico
Local da metástase
Nádega direita, hipoderme (melanoma primário/origem M14)
Aplicações
Investigação sobre metástases e invasão; modelo de controvérsia sobre o melanoma e o cancro da mama; mecanismos de resistência aos medicamentos; biologia tumoral; triagem farmacológica pré-clínica
Sinónimos
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais

04Identificadores

Referência
MDA-MB-435S (número de catálogo Cytion 300277)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 5% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
33 anos
Etnia
Europeu