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Cellule MDA-MB-435S
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma amelanotico
Sito metastatico
Gluteo destro, ipoderma (melanoma primario/origine M14)
Sinonimi
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

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Cellule MDA-MB-435S

Cell line · Codice prodotto 300277

Avviso: la linea cellulare in questione è stata identificata come problematica a causa di problemi di contaminazione. Nello specifico, la linea cellulare madre (MDA-MB-4...

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01Informazioni generali

Descrizione

Disclaimer: la linea cellulare in questione è stata identificata come problematica a causa di problemi di contaminazione. In particolare, la linea cellulare madre (MDA-MB-435) è risultata essere un derivato della linea cellulare M14.

La linea cellulare MDA-MB-435S è un modello ampiamente utilizzato nella ricerca sul cancro, originariamente ritenuto derivato da una metastasi di cancro al seno. Queste cellule presentano caratteristiche tipiche delle cellule tumorali altamente aggressive, tra cui un rapido tasso di proliferazione, resistenza all'apoptosi e capacità di invadere i tessuti circostanti. Grazie a queste caratteristiche, le cellule MDA-MB-435S sono spesso utilizzate negli studi che indagano sulle metastasi tumorali, sui meccanismi di resistenza ai farmaci e sulle basi molecolari del comportamento aggressivo dei tumori.

È interessante notare che successive analisi molecolari e genetiche hanno rivelato che le cellule MDA-MB-435S condividono un profilo genetico più simile a quello del melanoma che a quello del cancro al seno, sollevando implicazioni significative per il loro uso nella ricerca. Nonostante questa controversia, le cellule MDA-MB-435S rimangono un modello prezioso per lo studio dei processi metastatici e per la sperimentazione di potenziali agenti terapeutici, in particolare quelli che mirano a meccanismi comuni sia al cancro al seno che al melanoma. Si consiglia ai ricercatori di considerare queste scoperte genetiche quando interpretano i risultati ottenuti da studi che coinvolgono cellule MDA-MB-435S.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma amelanotico
Sito metastatico
Gluteo destro, ipoderma (melanoma primario/origine M14)
Applicazioni
Ricerca sulle metastasi e sull'invasività; modello di controversia tra melanoma e carcinoma mammario; meccanismi di resistenza ai farmaci; biologia tumorale; screening farmacologico preclinico
Sinonimi
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MDA-MB-435S (catalogo Cytion numero 300277)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
33 anni
Etnia
Europeo