Pāriet uz saturu
MDA-MB-435S šūnas
Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Labā sēžamvieta, zemādas slānis (primārā melanoma/izcelsme M14)
Sinonīmi
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Dokumenti

MDA-MB-435S šūnas

Cell line · Preces numurs 300277

Atruna: Minētā šūnu līnija ir atzīta par problemātisku saistībā ar piesārņojuma problēmām. Konkrētāk, sākotnējā šūnu līnija (MDA-MB-4...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Atruna: Attiecīgā šūnu līnija ir identificēta kā problemātiska piesārņojuma dēļ. Konkrēti, ir pierādīts, ka pamatšūnu līnija (MDA-MB-435) ir M14 šūnu līnijas atvasinājums.

MDA-MB-435S šūnu līnija ir plaši izmantots vēža izpētes modelis, par kuru sākotnēji tika uzskatīts, ka tā ir iegūta no krūts vēža metastāzēm. Šīm šūnām piemīt ļoti agresīvām vēža šūnām raksturīgas īpašības, tostarp ātra proliferācija, rezistence pret apoptozi un spēja iebrukt apkārtējos audos. Šo īpašību dēļ MDA-MB-435S šūnas bieži izmanto pētījumos, kuros pēta vēža metastāzes, rezistences pret zālēm mehānismus un agresīvas audzēju uzvedības molekulāros pamatus.

Interesanti, ka turpmākās molekulārās un ģenētiskās analīzes atklāja, ka MDA-MB-435S šūnām ir tuvāks ģenētiskais profils ar melanomu, nevis krūts vēzi, kas būtiski ietekmē to izmantošanu pētniecībā. Neraugoties uz šīm pretrunām, tās joprojām ir vērtīgs modelis metastātisku procesu izpētei un potenciālo terapeitisko līdzekļu testēšanai, jo īpaši tādu, kas vērsti pret mehānismiem, kuri ir kopīgi gan krūts vēzim, gan melanomai. Pētniekiem ieteicams ņemt vērā šos ģenētiskos atklājumus, interpretējot rezultātus, kas iegūti pētījumos ar MDA-MB-435S šūnām.

Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Labā sēžamvieta, zemādas slānis (primārā melanoma/izcelsme M14)
Pieteikumi
Pētījumi par metastāzēm un invāziju; melanomas un krūts vēža pretrunu modelis; zāļu rezistences mehānismi; audzēju bioloģija; pirmsklīniskā farmakoloģiskā skrīninga
Sinonīmi
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas

04Identifikatori

Atsauce
MDA-MB-435S (Cytion kataloga numurs 300277)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 5% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
33 gadi
Etniskā piederība
Eiropas