Pāriet uz saturu
MDA-MB-436 šūnas
Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
MDA_MB_436, MDA MB 436, MDA-Mb-436, MDA-MB436, MDAMB436, MDA-436, MDA436, MB436, MD Anderson-Metastatic Breast-436

Dokumenti

MDA-MB-436 šūnas

Cell line · Preces numurs 300278

MDA-MB-436 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka krūts adenokarcinomas. Šo šūnu līniju raksturo trīskārši negatīvā krūts vēža (TNBC) fenotips...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDA-MB-436 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka krūts adenokarcinomas. Šai šūnu līnijai ir raksturīgs trīskārši negatīvs krūts vēža (TNBC) fenotips bez estrogēnu receptora (ER), progesterona receptora (PR) un cilvēka epidermālā augšanas faktora 2 (HER2) ekspresijas. Šādas īpašības padara to par nenovērtējamu modeli, lai pētītu TNBC, kas ir īpaši agresīvs un grūti ārstējams krūts vēža apakštips. Šīm šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās ir pazīstamas ar spēcīgu proliferatīvo spēju in vitro.

No ģenētiskā viedokļa MDA-MB-436 šūnās ir mutācijas galvenajos ar vēzi saistītajos gēnos, tostarp BRCA1 un TP53. Īpaši interesanta ir BRCA1 mutācija, jo tā atspoguļo ģenētiskās izmaiņas, kas konstatētas iedzimtā krūts vēža apakšgrupā. Tas padara MDA-MB-436 par būtisku instrumentu, lai pētītu mehānismus, kas ir BRCA1 saistīto audzēju rašanās pamatā, un lai pārbaudītu potenciālās terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas uz šiem ceļiem. Turklāt šī šūnu līnija ir izmantota pētījumos, kas vērsti uz rezistenci pret ķīmijterapiju, metastāzēm un audzēja mikrovidi.

Pētnieki, kas strādā ar MDA-MB-436 šūnām, gūst labumu no tās labi dokumentētajām īpašībām, kas ļauj iegūt reproducējamus un uzticamus eksperimentu rezultātus. Pētījumi, kuros izmantota šī šūnu līnija, būtiski veicina izpratni par TNBC bioloģiju un jaunu ārstēšanas metožu izstrādi šim sarežģītajam vēža apakštipam. Tomēr ir jāpievērš uzmanība eksperimentu plānošanai, jo hormonu receptoru un HER2 ekspresijas trūkuma dēļ ir nepieciešamas alternatīvas pieejas salīdzinājumā ar citiem krūts vēža modeļiem.

Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • MDA_MB_436
  • MDA MB 436
  • MDA-Mb-436
  • MDA-MB436
  • MDAMB436
  • MDA-436
  • MDA436
  • MB436
  • MD Anderson-Metastatic Breast-436

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Pleomorfas un daudzdiedziņu šūnas

04Identifikatori

Atsauce
MDA-MB-436 (Cytion kataloga numurs 300278)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0623

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 5% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
43 gadi
Etniskā piederība
Eiropas