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Cellule MDA-MB-436
Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
MDA_MB_436, MDA MB 436, MDA-Mb-436, MDA-MB436, MDAMB436, MDA-436, MDA436, MB436, MD Anderson-Metastatic Breast-436

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Cellule MDA-MB-436

Cell line · Codice prodotto 300278

La linea cellulare MDA-MB-436 deriva da un adenocarcinoma mammario umano. Questa linea cellulare è caratterizzata dal fenotipo del carcinoma mammario triplo negativo (TNBC)...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MDA-MB-436 deriva da un adenocarcinoma mammario umano. Questa linea cellulare si caratterizza per il suo fenotipo di cancro al seno triplo negativo (TNBC), privo dell'espressione del recettore degli estrogeni (ER), del recettore del progesterone (PR) e del recettore 2 del fattore di crescita epidermico umano (HER2). Tali caratteristiche ne fanno un modello prezioso per lo studio del TNBC, un sottotipo di cancro al seno particolarmente aggressivo e difficile da trattare. Le cellule presentano una morfologia epiteliale e sono note per la loro forte capacità proliferativa in vitro.

Dal punto di vista genetico, le cellule MDA-MB-436 presentano mutazioni in geni chiave legati al cancro, tra cui BRCA1 e TP53. La mutazione BRCA1 è di particolare interesse, poiché rispecchia le alterazioni genetiche riscontrate in un sottogruppo di tumori al seno ereditari. Ciò rende MDA-MB-436 uno strumento cruciale per studiare i meccanismi alla base della tumorigenesi associata a BRCA1 e per testare potenziali strategie terapeutiche mirate a queste vie. Inoltre, questa linea cellulare è stata impiegata in ricerche incentrate sulla resistenza alla chemioterapia, sulle metastasi e sul microambiente tumorale.

I ricercatori che lavorano con le cellule MDA-MB-436 beneficiano delle sue caratteristiche ben documentate, che consentono di ottenere risultati sperimentali riproducibili e affidabili. Gli studi che utilizzano questa linea cellulare contribuiscono in modo significativo alla comprensione della biologia del TNBC e allo sviluppo di nuovi trattamenti per questo difficile sottotipo di tumore. Tuttavia, è necessario prestare attenzione al disegno sperimentale, poiché l'assenza di recettori ormonali e di espressione di HER2 richiede approcci alternativi rispetto ad altri modelli di cancro al seno.

Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • MDA_MB_436
  • MDA MB 436
  • MDA-Mb-436
  • MDA-MB436
  • MDAMB436
  • MDA-436
  • MDA436
  • MB436
  • MD Anderson-Metastatic Breast-436

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Cellule pleomorfe e multinucleate

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MDA-MB-436 (catalogo Cytion numero 300278)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0623

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
43 anni
Etnia
Europeo