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Cellule MDA-MB-468
Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
MDA-MB 468, MDA-MB468, MDAMB468, MDA-468, MDA468, MB468, MD Anderson-Metastatic Breast-468

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Cellule MDA-MB-468

Cell line · Codice prodotto 300279

La linea cellulare MDA-MB-468 è una linea cellulare ben consolidata di carcinoma mammario umano derivata dal versamento pleurico di una paziente adulta affetta da adenocarcinoma metastatico...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MDA-MB-468 è una linea cellulare ben consolidata di cancro al seno umano derivata dal versamento pleurico di una paziente adulta con adenocarcinoma metastatico. Queste cellule sono caratterizzate da una morfologia epiteliale e sono note per il loro elevato grado di aneuploidia. Le cellule MDA-MB-468 sono negative al recettore degli estrogeni (ER-) e sono spesso utilizzate come modello per studiare il carcinoma mammario triplo-negativo (TNBC), un sottotipo di carcinoma mammario che manca dell'espressione del recettore degli estrogeni (ER), del recettore del progesterone (PR) e di HER2/neu. Ciò rende MDA-MB-468 uno strumento fondamentale per la ricerca sui tumori che non rispondono alla terapia ormonale o ai trattamenti mirati a HER2.

Dal punto di vista genetico, le cellule MDA-MB-468 presentano mutazioni nel gene TP53, che è comune in varie forme di cancro e svolge un ruolo significativo nella regolazione del ciclo cellulare e nell'apoptosi. La linea cellulare mostra anche un'amplificazione del gene del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR), contribuendo alla sua utilità nello studio della via di segnalazione dell'EGFR e delle sue implicazioni nella progressione del cancro e nella resistenza ai trattamenti. I ricercatori utilizzano spesso le cellule MDA-MB-468 per studiare i meccanismi di resistenza ai farmaci, testare nuovi agenti terapeutici ed esplorare la biologia molecolare dei tumori al seno aggressivi.

Oltre alle loro caratteristiche genetiche e fenotipiche, le cellule MDA-MB-468 sono note per la loro capacità di formare xenotrapianti in topi immunocompromessi, il che le rende un modello prezioso per gli studi in vivo della crescita tumorale e delle metastasi. La reattività di questa linea cellulare a vari agenti chemioterapici e terapie mirate è ampiamente studiata per sviluppare strategie di trattamento efficaci per il TNBC. Nel complesso, la linea cellulare MDA-MB-468 è una risorsa cruciale per il progresso della ricerca sul cancro al seno, in particolare nel contesto dei tumori maligni triplo-negativi e EGFR-positivi.

Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • MDA-MB 468
  • MDA-MB468
  • MDAMB468
  • MDA-468
  • MDA468
  • MB468
  • MD Anderson-Metastatic Breast-468

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MDA-MB-468 (catalogo Cytion numero 300279)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0419

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
51 anni
Etnia
Africano