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Cellule MDA-MB-231
Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
MDA_MB_231, MDA-MB 231, MDA.MB.231, MDA MB 231, MDA MB231, MDA Mb231, MDA-MB231, MDAMB-231, MDAMB231, MDA-231, MDA-231P, MDA231, MDA231-BRE, MB231, MD Anderson-Metastatic Breast-231

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Cellule MDA-MB-231

Cell line · Codice prodotto 300275

La linea cellulare MDA-MB-231 è un modello ampiamente utilizzato nella ricerca sul cancro al seno. Derivanti da un adenocarcinoma mammario umano, queste cellule sono caratterizzate da...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MDA-MB-231 è un modello ampiamente utilizzato nella ricerca sul cancro al seno. Derivate da un adenocarcinoma mammario umano, queste cellule sono caratterizzate da una natura aggressiva e invasiva, che le rende un modello ideale per lo studio del carcinoma mammario triplo-negativo (TNBC). Le cellule MDA-MB-231 mancano dei recettori per gli estrogeni (ER), del progesterone (PR) e dell'amplificazione di HER2, tipici marcatori utilizzati per classificare e trattare i tumori al seno. Di conseguenza, queste cellule sono resistenti alle terapie ormonali, il che riflette le sfide cliniche affrontate nella gestione del TNBC. Il loro fenotipo mesenchimale e la capacità di formare tumori in topi immunocompromessi contribuiscono ulteriormente alla loro utilità nella ricerca sul cancro.

Dal punto di vista genetico, le cellule MDA-MB-231 presentano mutazioni in oncogeni chiave e geni soppressori del tumore come TP53, KRAS e BRAF. Queste alterazioni genetiche svolgono un ruolo cruciale nel determinare la malignità e il potenziale metastatico delle cellule. I ricercatori utilizzano questa linea cellulare per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del cancro, delle metastasi e della resistenza ai farmaci. Le cellule MDA-MB-231 sono anche impiegate per lo screening ad alto rendimento di potenziali agenti terapeutici, poiché il loro comportamento aggressivo costituisce un test rigoroso per i nuovi farmaci antitumorali. La robusta risposta della linea cellulare a vari stimoli la rende uno strumento prezioso per decifrare la complessa biologia del cancro al seno triplo negativo.

Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • MDA_MB_231
  • MDA-MB 231
  • MDA.MB.231
  • MDA MB 231
  • MDA MB231
  • MDA Mb231
  • MDA-MB231
  • MDAMB-231
  • MDAMB231
  • MDA-231
  • MDA-231P
  • MDA231
  • MDA231-BRE
  • MB231
  • MD Anderson-Metastatic Breast-231

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MDA-MB-231 (catalogo Cytion numero 300275)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0062

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
51 anni
Etnia
Europeo