Pāriet uz saturu
MDA-MB-231 šūnas
Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
MDA_MB_231, MDA-MB 231, MDA.MB.231, MDA MB 231, MDA MB231, MDA Mb231, MDA-MB231, MDAMB-231, MDAMB231, MDA-231, MDA-231P, MDA231, MDA231-BRE, MB231, MD Anderson-Metastatic Breast-231

Dokumenti

MDA-MB-231 šūnas

Cell line · Preces numurs 300275

MDA-MB-231 šūnu līnija ir plaši izmantots modelis krūts vēža pētījumos. Šīs šūnas, kas iegūtas no cilvēka krūts adenokarcinomas, raksturo...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDA-MB-231 šūnu līnija ir plaši izmantots krūts vēža izpētes modelis. Šīm šūnām, kas iegūtas no cilvēka krūts adenokarcinomas, ir raksturīga agresīva un invazīva daba, tāpēc tās ir ideāls modelis trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) izpētei. MDA-MB-231 šūnās nav estrogēnu receptoru (ER), progesterona receptoru (PR) un HER2 amplifikācijas, kas ir tipiski marķieri, kurus izmanto krūts vēža klasifikācijai un ārstēšanai. Līdz ar to šīs šūnas ir rezistentas pret hormonālo terapiju, kas atspoguļo klīniskās problēmas, ar kurām saskaras TNBC ārstēšana. To mezenhimam līdzīgais fenotips un spēja veidot audzējus imūnkompromitētās pelēs vēl vairāk veicina to lietderību vēža pētniecībā.

No ģenētiskā viedokļa MDA-MB-231 šūnās ir mutācijas galvenajos onkogēnos un audzēja supresoru gēnos, piemēram, TP53, KRAS un BRAF. Šīm ģenētiskajām izmaiņām ir izšķiroša nozīme, lai veicinātu to ļaundabīgumu un metastātisko potenciālu. Pētnieki izmanto šo šūnu līniju, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir pamatā vēža progresēšanai, metastāzēm un rezistencei pret zālēm. MDA-MB-231 šūnas izmanto arī augstas izšķirtspējas potenciālo terapeitisko līdzekļu skrīningā, jo to agresīvā uzvedība nodrošina stingru pārbaudi jauniem pretvēža līdzekļiem. Šūnu līnijas spēcīgā reakcija uz dažādiem stimuliem padara to par nenovērtējamu rīku trīskārši negatīva krūts vēža sarežģītās bioloģijas atšifrēšanai.

Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • MDA_MB_231
  • MDA-MB 231
  • MDA.MB.231
  • MDA MB 231
  • MDA MB231
  • MDA Mb231
  • MDA-MB231
  • MDAMB-231
  • MDAMB231
  • MDA-231
  • MDA-231P
  • MDA231
  • MDA231-BRE
  • MB231
  • MD Anderson-Metastatic Breast-231

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
MDA-MB-231 (Cytion kataloga numurs 300275)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0062

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 5% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
51 gads
Etniskā piederība
Eiropas