Pāriet uz saturu
MCF-7 šūnas
Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
MCF 7, MCF.7, MCF7, Michigan Cancer Foundation-7, ssMCF-7, ssMCF7, MCF7/WT, MCF7-CTRL, IBMF-7

Dokumenti

MCF-7 šūnas

Cell line · Preces numurs 300273

MCF7 šūnas, kas ir plaši izmantots pētījumu modelis cilvēka krūts vēža izpētē, tiek plaši izmantotas kā in vitro modelis hormonu atkarīgajam krūts vēzim...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MCF7 šūnas, kas ir plaši izmantots modelis cilvēka krūts vēža pētniecībā, tiek plaši izmantotas kā in vitro modelis hormonāli atkarīgam krūts vēzim. MCF7 šūnas, kas iegūtas no 69 gadus vecas baltādainas sievietes krūts audiem ar metastātisku adenokarcinomu, ir plaši izmantots in vitro modelis hormonāli atkarīgam krūts vēzim, kas atspoguļo Luminal A apakštipu. Šim apakštipam ir raksturīga zemāka pakāpe un labāka prognoze salīdzinājumā ar agresīvākām krūts vēža formām.

Krūts vēža pētniecībā MCF 7 šūnas ir noderīgas, lai novērtētu krūts vēža zāļu efektivitāti un izprastu krūts vēža cilmes šūnu dinamiku. Tās ir ļoti svarīgas vēža pētniecībā, jo kalpo kā salīdzinošs modelis salīdzinājumā ar agresīvākām šūnu līnijām, piemēram, MDA-MB-231.

Terapeitisko līdzekļu, piemēram, tamoksifēna un doksorubicīna, izpētei ir izšķiroša nozīme zāļu atklāšanā, kas vērsta pret hormonāli atkarīgu krūts vēzi, un ieskatu gūšanā par darbības un rezistences mehānismiem. Tāpat arī estradiola loma šo šūnu augšanas un īpašību modulēšanā ir ļoti interesants jautājums, ņemot vērā tā nozīmi hormonu atkarīgo krūts vēžu gadījumā.

Pētījumos, kuros izmanto MCF7 krūts vēža šūnu līniju, bieži tiek pētīti šūnu citotoksicitātes un apoptozes procesi, jo īpaši reaģējot uz tādiem vēža ierosinātājiem kā kurkumīns, kas pazīstams ar savu potenciālu vēža profilaksē. Imūnreakcijas izpēte, tostarp audzēja nekrozes faktora alfa (TNF alfa) iedarbība un baktēriju antigēnu ietekme, vēl vairāk bagātina mūsu izpratni par audzēja mikrovidi un potenciālajiem terapeitiskajiem mērķiem.

MCF7 šūnas tiek rūpīgi pētītas gan 2D šūnu kultūrā, gan 3D šūnu kultūru sistēmās, tostarp sferoīdu kultūrā, lai precīzāk atdarinātu audzēja mikrovidi. Šīs metodikas ļauj padziļināti izpētīt šūnu sferoīdu augšanu un vēža cilmes šūnu uzvedību mikrodaļiņās uz sastatņu balstītās sistēmās.

MCF7 šūnu līnija ar savām epitēlija šūnu īpašībām un līdzību ar cilvēka adenokarcinomas šūnām ir vēža pētījumu stūrakmens. Tā atvieglo ne tikai krūts vēža zāļu un to darbības mehānismu izpēti, bet arī plašāku ietekmi uz vēža ārstēšanu, tostarp mezenhimālo cilmes šūnu potenciālo lomu un mērķterapiju efektivitāti in vivo pētījumos.

Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • MCF 7
  • MCF.7
  • MCF7
  • Michigan Cancer Foundation-7
  • ssMCF-7
  • ssMCF7
  • MCF7/WT
  • MCF7-CTRL
  • IBMF-7

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
Cilmes līnijas hromosomu skaits svārstījās no hipertriploīdijas līdz hipotetraploīdijai, un 2S komponents sastopams 1 % gadījumu. Katrā S metafāzē bija no 29 līdz 34 marķieru hromosomām, 24 līdz 28 marķieri bija sastopami vismaz 30 % šūnu, un parasti viens lielais submetacentriskais (M1) un 3 lielie subtelocentriskie (M2, M3 un M4) marķieri bija atpazīstami vairāk nekā 80 % metafāžu. DM netika konstatēti. Hromosoma 20 bija nullisomiska, un x bija disomiska. Fenotipa biežuma produkts: 0.0154
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MCF-7 (Cytion kataloga numurs 300273)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0031

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Šūnas ekspresē savvaļas tipa un variantu estrogēnu receptorus, kā arī progesterona receptoru.
Proteīnu ekspresija
P53 negatīvs, pGP9.5 negatīvs, CEA pozitīvs
Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Onkogēni
Wnt7h +, Tx-4
Mutāciju profils
TP53 wt
Produkti
Insulīnam līdzīgo augšanas faktoru saistošie proteīni (IGFBP) BP-2, BP-4, BP-5

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām atpūsties 48 stundas pēc atkausēšanas
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
69 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis