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Células MCF-7
Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
MCF 7, MCF.7, MCF7, Michigan Cancer Foundation-7, ssMCF-7, ssMCF7, MCF7/WT, MCF7-CTRL, IBMF-7

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Células MCF-7

Cell line · Número do produto 300273

As células MCF7, um modelo de investigação amplamente utilizado na investigação do cancro da mama humano, são amplamente utilizadas como modelo in vitro para o cancro da mama dependente de hormonas...

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01Informações gerais

Descrição

As células MCF7, um modelo de investigação amplamente utilizado na investigação do cancro da mama humano, são amplamente utilizadas como modelo in vitro para o cancro da mama dependente de hormonas. Provenientes do tecido mamário de uma mulher branca de 69 anos com adenocarcinoma metastático, as células MCF7 são um modelo in vitro amplamente utilizado para o cancro da mama dependente de hormonas, reflectindo o subtipo Luminal A. Este subtipo é caracterizado por um grau inferior e um melhor prognóstico em comparação com formas mais agressivas de cancro da mama.

No domínio da investigação do cancro da mama, as células MCF 7 são fundamentais para avaliar a eficácia dos medicamentos contra o cancro da mama e compreender a dinâmica das células estaminais do cancro da mama. São fundamentais para a investigação do cancro, servindo de modelo comparativo em relação a linhas celulares mais agressivas como a MDA-MB-231.

A investigação de agentes terapêuticos, como o tamoxifeno e a doxorrubicina, é fundamental para os esforços de descoberta de medicamentos destinados aos cancros da mama hormono-dependentes e para a compreensão dos mecanismos de ação e resistência. Do mesmo modo, o papel do estradiol na modulação do crescimento e das caraterísticas destas células é um tema de grande interesse, dada a sua relevância para os cancros da mama hormono-responsivos.

A investigação que utiliza a linha celular de cancro da mama MCF7 debruça-se frequentemente sobre os processos celulares de citotoxicidade e apoptose, especialmente em resposta a agentes cancerígenos como a curcumina, conhecida pelo seu potencial na prevenção do cancro. O estudo das respostas imunitárias, incluindo a ação do fator de necrose tumoral alfa (TNF alfa) e o impacto dos antigénios bacterianos, enriquece ainda mais a nossa compreensão do microambiente tumoral e dos potenciais alvos terapêuticos.

As células MCF7 são meticulosamente estudadas em sistemas de cultura de células 2D e 3D, incluindo cultura de esferóides, para imitar mais de perto os microambientes tumorais. Estas metodologias permitem uma exploração mais profunda do crescimento dos esferóides celulares e do comportamento das células estaminais cancerígenas no interior de microtecidos em sistemas baseados em andaimes.

A linha celular MCF7, com as suas caraterísticas de célula epitelial e semelhança com as células de adenocarcinoma humano, é uma pedra angular da investigação sobre o cancro. Facilita não só a exploração dos medicamentos contra o cancro da mama e dos seus mecanismos, mas também as implicações mais vastas para o tratamento do cancro, incluindo o papel potencial das células estaminais mesenquimatosas e a eficácia das terapias orientadas em estudos in vivo.

Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • MCF 7
  • MCF.7
  • MCF7
  • Michigan Cancer Foundation-7
  • ssMCF-7
  • ssMCF7
  • MCF7/WT
  • MCF7-CTRL
  • IBMF-7

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Cariótipo
O número de cromossomas da linha de caule variou entre a hipertriploidia e a hipotetraploidia, com o componente 2S a ocorrer a 1%. Havia 29 a 34 cromossomas marcadores por metáfase S, 24 a 28 marcadores ocorriam em pelo menos 30% das células e, em geral, um grande marcador submetacêntrico (M1) e 3 grandes marcadores subtelocêntricos (M2, M3 e M4) eram reconhecíveis em mais de 80% das metáfases. Não foram detectados DM. O cromossoma 20 foi nulisómico e o x foi dissómico. Produto de frequência do fenótipo: 0.0154
Tempo de duplicação
24 horas

04Identificadores

Referência
MCF-7 (número de catálogo Cytion 300273)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0031

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
As células expressam os receptores de estrogénio do tipo selvagem e variante, bem como o recetor de progesterona.
Expressão proteica
P53 negativo, pGP9.5 negativo, CEA positivo
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Oncogenes
Wnt7h +, Tx-4
Perfil mutacional
TP53 wt
Produtos
Proteínas de ligação ao fator de crescimento semelhante à insulina (IGFBP) BP-2, BP-4, BP-5

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Deixar as células repousar durante 48 horas após a descongelação
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
69 anos
Etnia
Caucasiano