MCF10A

A linha celular epitelial mamária humana MCF10A, estabelecida a partir da glândula mamária de uma mulher de 36 anos com doença fibrocística, serve de modelo para o estudo dos meandros da função normal das células da mama, da transformação e da transição epitelial para mesenquimal, crítica na transição para o carcinoma da mama invasivo.

Sendo uma linha de células epiteliais não tumorigénicas derivada de tecido mamário proliferativo benigno, as células MCF10A são fundamentais para o estudo das células mamárias, oferecendo conhecimentos sobre a progressão dos tumores da mama e a dinâmica das células tumorais nas mammosferas. As células MCF10 A, caracterizadas pelo seu crescimento tridimensional em colagénio e pela sua capacidade de formar estruturas acinares em Matrigel misto, constituem um modelo fiável para analisar o impacto dos oncogenes e estudar a formação da mammosfera, o que é crucial para compreender as propriedades das células progenitoras mamárias e o seu papel na investigação do cancro.

A linha de células MCF10A, embora exibindo um fenótipo do tipo basal, expressa uma combinação de marcadores luminais e do tipo estaminal, bem como marcadores de células epiteliais, tais como citoqueratinas e proteínas do leite. A sua capacidade de resposta à insulina, aos glucocorticóides, à enterotoxina da cólera e ao fator de crescimento epidérmico (EGF) sublinha a importância dos factores de crescimento e das hormonas na proliferação e sobrevivência das células do tecido mamário humano.

O modelo MCF 10A proporciona uma janela para as vias de sinalização genómica que regem o comportamento e o fenótipo das células em cultura 3D, oferecendo uma plataforma para a coloração por imuno-histoquímica e imunofluorescência para visualizar os processos celulares.
Estas células são cruciais para o estudo da transição das células mamárias durante o desenvolvimento do cancro da mama, incluindo o papel da genotoxicidade do produto da oxidação lipídica e o impacto de componentes dietéticos como o inibidor de tripsina da soja na função celular. Além disso, a comparação da linha celular MCF 10A com outras linhas, como a MCF7 (que é tumorigénica e positiva para o recetor de estrogénio) e a MCF10F (outra linha não tumorigénica, mas com caraterísticas diferentes), enriquece a investigação sobre o cancro da mama, fornecendo modelos diversos para compreender o espetro de fenótipos não invasivos a altamente metastáticos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia