Skip to content
MCF10A
Tissue
ต่อมน้ำนม, เต้านม
Synonyms
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Documents

MCF10A

Cell line · Product number 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ MCF10A ซึ่งเป็นเซลล์เยื่อบุผิวเต้านมของมนุษย์ที่สร้างขึ้นจากต่อมน้ำนมของหญิงอายุ 36 ปีที่มีโรคเต้านมเป็นถุงน้ำและเนื้อเยื่อหนาขึ้น ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาความซับซ้อนของการทำงานของเซลล์เต้านมปกติ การเปลี่ยนแปลง และการเปลี่ยนผ่านจากเยื่อบุผิวไปเป็นเนื้อเยื่อเกี่ยวพันซึ่งมีความสำคัญในการเปลี่ยนผ่านของมะเร็งเต้านมที่รุกราน

ในฐานะเซลล์ไลน์เยื่อบุผิวที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อเต้านมที่มีการเพิ่มจำนวนแบบไม่ร้ายแรง เซลล์ MCF10A มีบทบาทสำคัญในการศึกษาเซลล์เต้านม โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการพัฒนาของเนื้องอกเต้านมและพลวัตของเซลล์เนื้องอกในแมมโมสเฟียร์เซลล์ MCF10 A ซึ่งมีลักษณะเด่นคือการเจริญเติบโตแบบสามมิติในคอลลาเจนและความสามารถในการสร้างโครงสร้างอะซินารใน Matrigel ผสม เป็นแบบจำลองที่เชื่อถือได้สำหรับการวิเคราะห์ผลกระทบของยีนก่อมะเร็งและการศึกษาการก่อตัวของแมมโมสเฟียร์ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดเต้านมและบทบาทของพวกมันในการวิจัยมะเร็ง

เซลล์ไลน์ MCF10A แม้จะแสดงลักษณะทางฟีโนไทป์แบบเบซัล แต่ก็แสดงออกของตัวบ่งชี้ทั้งแบบลูมินัลและแบบสเต็มเซลล์ รวมถึงตัวบ่งชี้ของเซลล์เยื่อบุผิว เช่น ซัยโตเคราตินและโปรตีนนม ความไวต่ออินซูลิน กลูโคคอร์ติคอยด์ โคลีราเอนเทอโรท็อกซิน และเอพิเดอร์มอล เติบโตแฟกเตอร์ (EGF) ของเซลล์เหล่านี้เน้นย้ำถึงความสำคัญของปัจจัยการเจริญเติบโตและฮอร์โมนในการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์เนื้อเยื่อเต้านมมนุษย์

แบบจำลอง MCF 10A ให้ภาพรวมของเส้นทางการส่งสัญญาณทางจีโนมที่ควบคุมพฤติกรรมของเซลล์และลักษณะทางฟีโนไทป์ในวัฒนธรรม 3 มิติ โดยเป็นแพลตฟอร์มสำหรับการย้อมสีทางอิมมูโนฮิสโตเคมีและอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์เพื่อแสดงกระบวนการของเซลล์
เซลล์เหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เต้านมในระหว่างการพัฒนาของมะเร็งเต้านม รวมถึงบทบาทของสารก่อกลายพันธุ์จากผลิตภัณฑ์ออกซิเดชันของไขมัน และผลกระทบของส่วนประกอบในอาหาร เช่น สารยับยั้งทริปซินจากถั่วเหลือง ต่อการทำงานของเซลล์นอกจากนี้ การเปรียบเทียบเซลล์ไลน์ MCF 10A กับเซลล์ไลน์อื่น ๆ เช่น MCF7 (ซึ่งเป็นเซลล์ก่อเนื้องอกและมีตัวรับเอสโตรเจนเป็นบวก) และ MCF10F (ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์ที่ไม่ก่อเนื้องอกแต่มีลักษณะแตกต่างกัน) ช่วยเสริมสร้างงานวิจัยมะเร็งเต้านมโดยให้แบบจำลองที่หลากหลายสำหรับการทำความเข้าใจสเปกตรัมของฟีโนไทป์ตั้งแต่แบบไม่รุกล้ำไปจนถึงแบบที่มีการแพร่กระจายสูง

Tissue
ต่อมน้ำนม, เต้านม
Synonyms
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่

04Identifiers

Citation
MCF10A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305026)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมเซรั่มม้า 5% ในอาหารเลี้ยงเชื้อ, EGF 20 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, ไฮโดรคอร์ติโซน 0.5 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, อินซูลิน 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร. หากจำเป็น ให้เติมโคลีราท็อกซิน 100 นาโนกรัม/มิลลิลิตร.
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
36 ปี