MCF10A

A linhagem celular epitelial mamária humana MCF10A, isolada da glândula mamária de uma mulher de 36 anos com doença fibrocística, serve como modelo para o estudo das complexidades da função normal das células mamárias, da transformação celular e da transição epitelial-mesenquimal, fundamental no desenvolvimento do carcinoma de mama invasivo.

Por ser uma linhagem celular epitelial não tumorigênica derivada de tecido mamário proliferativo benigno, as células MCF10A são fundamentais nos estudos de células mamárias, oferecendo insights sobre a progressão do tumor mamário e a dinâmica das células tumorais nas mamosferas. As células MCF10A, caracterizadas por seu crescimento tridimensional em colágeno e sua capacidade de formar estruturas acinares em Matrigel misto, fornecem um modelo confiável para analisar o impacto dos oncogenes e estudar a formação de mamossferas, o que é crucial para compreender as propriedades das células progenitoras mamárias e seu papel na pesquisa do câncer.

A linhagem celular MCF10A, embora apresente um fenótipo do tipo basal, expressa uma combinação de marcadores luminais e do tipo-tronco, bem como marcadores de células epiteliais, como citoqueratinas e proteínas do leite. Sua responsividade à insulina, aos glicocorticoides, à enterotoxina da cólera e ao fator de crescimento epidérmico (EGF) ressalta a importância dos fatores de crescimento e dos hormônios na proliferação e sobrevivência das células do tecido mamário humano.

O modelo MCF 10A oferece uma visão das vias de sinalização genômica que regem o comportamento celular e o fenótipo em cultura 3D, servindo de plataforma para imuno-histoquímica e coloração por imunofluorescência para visualizar processos celulares.
Essas células são cruciais para o estudo da transição das células mamárias durante o desenvolvimento do câncer de mama, incluindo o papel da genotoxicidade dos produtos da oxidação lipídica e o impacto de componentes alimentares, como o inibidor de tripsina da soja, na função celular. Além disso, a comparação da linhagem celular MCF 10A com outras linhagens, como a MCF7 (que é tumorigênica e positiva para o receptor de estrogênio) e a MCF10F (outra linha não tumorigênica, mas com características diferentes) enriquece a pesquisa sobre o câncer de mama, fornecendo diversos modelos para a compreensão do espectro de fenótipos que vão desde os não invasivos até os altamente metastáticos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.