MCF10A

Linia ludzkich komórek nabłonkowych sutka MCF10A, utworzona z gruczołu sutkowego 36-letniej kobiety z chorobą włóknisto-torbielowatą, służy jako model do badania zawiłości normalnej funkcji komórek piersi, transformacji i przejścia nabłonkowego do mezenchymalnego krytycznego w inwazyjnym przejściu raka piersi.

Jako nienowotworowa linia komórek nabłonkowych pochodząca z łagodnej proliferacyjnej tkanki piersi, komórki MCF10A odgrywają kluczową rolę w badaniach nad komórkami sutka, oferując wgląd w progresję guza piersi i dynamikę komórek nowotworowych w mammosferach. Komórki MCF10A, charakteryzujące się trójwymiarowym wzrostem w kolagenie i zdolnością do tworzenia struktur acinarnych w mieszanym Matrigelu, stanowią wiarygodny model do analizy wpływu onkogenów i badania tworzenia mammosfer, co ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia właściwości komórek progenitorowych sutka i ich roli w badaniach nad rakiem.

Linia komórkowa MCF10A, wykazując fenotyp podobny do podstawowego, wyraża kombinację markerów luminalnych i macierzystych, a także markerów komórek nabłonkowych, takich jak cytokeratyny i białka mleka. Ich reaktywność na insulinę, glukokortykoidy, enterotoksynę cholery i naskórkowy czynnik wzrostu (EGF) podkreśla znaczenie czynników wzrostu i hormonów w proliferacji i przeżyciu ludzkich komórek tkanki piersi.

Model MCF 10A zapewnia wgląd w genomowe szlaki sygnałowe, które regulują zachowanie i fenotyp komórek w hodowli 3D, oferując platformę do immunohistochemii i barwienia immunofluorescencyjnego w celu wizualizacji procesów komórkowych.
Komórki te mają kluczowe znaczenie dla badania transformacji komórek sutka podczas rozwoju raka piersi, w tym roli genotoksyczności produktów utleniania lipidów i wpływu składników diety, takich jak sojowy inhibitor trypsyny, na funkcjonowanie komórek. Co więcej, porównanie linii komórkowej MCF 10A z innymi liniami, takimi jak MCF7 (która jest nowotworowa i dodatnia pod względem receptora estrogenowego) i MCF10F (inna linia nienowotworowa, ale o innych cechach) wzbogaca badania nad rakiem piersi, zapewniając różnorodne modele do zrozumienia spektrum fenotypów od nieinwazyjnych do wysoce przerzutowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym