الانتقال إلى المحتوى
MCF10A
الأنسجة
الغدة الثديية، الثدي
المرادفات
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

المستندات

MCF10A

Cell line · رقم المنتج 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُستخدم خط الخلايا الظهارية الثديية البشرية MCF10A، الذي تم إنشاؤه من الغدة الثديية لأنثى تبلغ من العمر 36 عاماً مصابة بمرض الكيس الليفي، كنموذج لدراسة تعقيدات وظيفة خلايا الثدي الطبيعية والتحول والانتقال من الظهارة إلى النسيج المتوسط الحرج في انتقال سرطان الثدي الغازي.

وباعتبارها خط خلايا طلائية غير سرطانية غير سرطانية مشتقة من أنسجة الثدي التكاثري الحميد، تُعد خلايا MCF10A مفيدة في دراسات الخلايا الثديية، حيث تقدم رؤى حول تطور ورم الثدي وديناميكيات الخلايا السرطانية في الغلاف الثديي. وتوفر خلايا MCF10 A، التي تتميز بنموها ثلاثي الأبعاد في الكولاجين وقدرتها على تشكيل هياكل أسينار في ماتريجل مختلط، نموذجاً موثوقاً لتحليل تأثير الجينات الورمية ودراسة تكوين الغلاف الثديي، وهو أمر بالغ الأهمية لفهم خصائص الخلايا الثديية السلف ودور هذه الخلايا في أبحاث السرطان.

بينما يُظهر خط خلايا MCF10A نمطًا ظاهريًا شبيهًا بالنمط الظاهري القاعدي، فإنه يعبر عن مزيج من العلامات اللمعية والعلامات الجذعية، بالإضافة إلى علامات الخلايا الظهارية مثل السيتوكيراتين وبروتينات الحليب. وتؤكد استجابتها للأنسولين، والجلوكوكورتيكويدات، والسموم المعوية للكوليرا، وعامل نمو البشرة (EGF) على أهمية عوامل النمو والهرمونات في تكاثر خلايا أنسجة الثدي البشرية وبقائها على قيد الحياة.

يوفر نموذج MCF 10A، نافذة على مسارات الإشارات الجينومية التي تحكم سلوك الخلية ونمطها الظاهري في المزرعة ثلاثية الأبعاد، مما يوفر منصة للكيمياء المناعية والتلوين المناعي لتصور العمليات الخلوية.
تُعد هذه الخلايا ضرورية لدراسة تحول الخلايا الثديية أثناء تطور سرطان الثدي، بما في ذلك دور السمية الجينية لمنتج أكسدة الدهون وتأثير المكونات الغذائية مثل مثبط التربسين بفول الصويا على وظيفة الخلية. وعلاوة على ذلك، فإن مقارنة خط خلايا MCF 10A مع خطوط أخرى مثل MCF7 (وهي خلايا مولدة للأورام وإيجابية لمستقبلات الإستروجين) و MCF10F (خط آخر غير مولد للأورام ولكن بخصائص مختلفة) يثري أبحاث سرطان الثدي من خلال توفير نماذج متنوعة لفهم طيف الأنماط الظاهرية غير الغازية إلى الأنماط الظاهرية شديدة الانتشار.

الأنسجة
الغدة الثديية، الثدي
المرادفات
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
لا يوجد

04المعرّفات

المرجع
MCF10A (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305026)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0598

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 5% مصل الحصان، و20 نانوغرام/ملليتر EGF، و0,5 ميكروغرام/ملليتر هيدروكورتيزون، و10 ميكروغرام/ملليتر أنسولين. أضف 100 نانوغرام/ملل من سم الكوليرا إذا لزم الأمر.
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
36 سنة