Gå direkt till innehållet
MCF10A
Vävnad
Bröstkörtel, bröst
Synonymer
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

MCF10A

Cell line · Produktnummer 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Den humana bröstcellslinjen MCF10A, som framställts från bröstkörteln hos en 36-årig kvinna med fibrocystisk sjukdom, fungerar som en modell för att studera de invecklade egenskaperna hos normal bröstcellsfunktion, omvandling och övergången från epitel till mesenkymal, som är kritisk vid övergången till invasiv bröstcancer.

MCF10A-cellerna, som är en icke-tumorogen epitelcellinje från godartad proliferativ bröstvävnad, är viktiga för studier av bröstceller och ger insikter i brösttumörernas utveckling och tumörcellernas dynamik i mammosfärer. MCF10 A-cellerna, som kännetecknas av sin tredimensionella tillväxt i kollagen och sin förmåga att bilda acinära strukturer i blandad matrigel, utgör en tillförlitlig modell för att analysera onkogeners inverkan och studera mammosfärbildningen, vilket är avgörande för att förstå egenskaperna hos progenitorceller i bröstcancer och deras roll i cancerforskningen.

MCF10A-cellinjen uppvisar en basalliknande fenotyp, men uttrycker en kombination av luminala och stamliknande markörer, liksom epitelcellsmarkörer som cytokeratiner och mjölkproteiner. Att de reagerar på insulin, glukokortikoider, koleraenterotoxin och epidermal tillväxtfaktor (EGF) understryker betydelsen av tillväxtfaktorer och hormoner för spridning och överlevnad av mänskliga bröstvävnadsceller.

MCF 10A-modellen ger en inblick i de genomiska signalvägar som styr cellernas beteende och fenotyp i 3D-kultur, och erbjuder en plattform för immunhistokemi och immunfluorescensfärgning för att visualisera cellulära processer.
Dessa celler är avgörande för att studera övergången av bröstceller under utvecklingen av bröstcancer, inklusive rollen för lipidoxidationsproduktens genotoxicitet och inverkan av kostkomponenter som sojabönans trypsininhibitor på cellfunktionen. Jämförelsen mellan MCF 10A-cellinjen och andra linjer som MCF7 (som är tumörframkallande och östrogenreceptorpositiv) och MCF10F (en annan icke-tumörframkallande linje men med andra egenskaper) berikar dessutom bröstcancerforskningen genom att tillhandahålla olika modeller för att förstå spektrumet av icke-invasiva till mycket metastatiska fenotyper.

Vävnad
Bröstkörtel, bröst
Synonymer
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumörframkallande
Nej

04Identifierare

Källa
MCF10A (Cytion-katalognummer 305026)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera med 5% hästserum, 20 ng/mL EGF, 0,5 mikrogram/mL hydrokortison, 10 mikrogram/mL insulin. Tillsätt 100 ng/mL koleratoxin vid behov.
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
36 år