
- Kude
- Rinnanäärme, rind
- Sünonüümid
- MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A
Dokumendid
MCF10A
Cell line · Toote number 305026
The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...
Kohandamine / Soovitused
- MCF10ACell line€550.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
Inimese rinnanäärme epiteelirakuliin MCF10A, mis on loodud 36-aastase fibrotsüstilise haigusega naise rinnanäärme rakuliinist, on mudeliks rinnanäärme normaalse rakufunktsiooni, transformatsiooni ja invasiivse rinnanäärmekartsinoomi ülemineku kriitilise epiteeli ja mesenhüümi vahelise ülemineku keerukuse uurimiseks.
MCF10A rakud kui healoomulisest proliferatiivsest rinnakust saadud mittetuumoriline epiteelirakuliin on rinnanäärme rakkude uuringutes väga olulised, andes ülevaate rinnakasvaja progresseerumisest ja kasvajarakkude dünaamikast mammosfääris. MCF10 A rakud, mida iseloomustab nende kolmemõõtmeline kasv kollageenis ja nende võime moodustada akiinseid struktuure segatud Matrigelis, pakuvad usaldusväärset mudelit onkogeenide mõju analüüsimiseks ja mammosfääri moodustumise uurimiseks, mis on ülioluline rinnanäärme eellaste omaduste ja nende rolli mõistmiseks vähiuuringutes.
MCF10A rakuliin, mis näitab basaalset fenotüüpi, ekspresseerib kombinatsiooni luminaalsetest ja tüvelistest markeritest ning epiteelirakkude markeritest, nagu tsütokeratiinid ja piimavalkud. Nende tundlikkus insuliini, glükokortikoidide, kolea enterotoksiini ja epidermise kasvufaktori (EGF) suhtes rõhutab kasvufaktorite ja hormoonide tähtsust inimese rinnanäärme rakkude proliferatsioonis ja ellujäämises.
MCF 10A mudel annab ülevaate genoomsetest signaaliradadest, mis reguleerivad rakkude käitumist ja fenotüüpi 3D-kultuuris, pakkudes platvormi immunohistokeemia ja immunofluorestsentsvärvimise jaoks, et visualiseerida rakulisi protsesse.
Need rakud on üliolulised rinnavähi arengu ajal toimuva rinnanäärme rakkude ülemineku uurimiseks, sealhulgas lipiidide oksüdatsioonitoote genotoksilisuse rolli ja selliste toitumiskomponentide nagu soja trüpsiini inhibiitori mõju rakkude toimimisele. Lisaks sellele rikastab MCF 10A rakuliini võrdlus teiste liinidega, nagu MCF7 (mis on tuumorigeenne ja östrogeeni retseptor-positiivne) ja MCF10F (teine mittetuumorigeenne, kuid teistsuguste omadustega liin), rinnavähiuuringuid, pakkudes mitmekesiseid mudeleid mitteinvasiivsete kuni tugevalt metastaatiliste fenotüüpide spektri mõistmiseks.- Kude
- Rinnanäärme, rind
- Sünonüümid
- MCF-10A
- MCF 10A
- MCF.10A
- MCF10A
- MCF10-A
- MCF10a
- MCF-10 Attached
- Michigan Cancer Foundation-10A
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
- Tuumorigeenne
- Ei
04Tunnused
- Viide
- MCF10A (Cytioni kataloognumber 305026)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0598
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendatakse keskkonda 5% hobuse seerumiga, 20 ng/ml EGF, 0,5 mikrogrammi/ml hüdrokortisooni, 10 mikrogrammi/ml insuliini. Vajaduse korral lisage 100 ng/ml kooleratoksiini.
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 36 aastat
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah

