Mine otse sisu juurde
MCF10A
Kude
Rinnanäärme, rind
Sünonüümid
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Dokumendid

MCF10A

Cell line · Toote number 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese rinnanäärme epiteelirakuliin MCF10A, mis on loodud 36-aastase fibrotsüstilise haigusega naise rinnanäärme rakuliinist, on mudeliks rinnanäärme normaalse rakufunktsiooni, transformatsiooni ja invasiivse rinnanäärmekartsinoomi ülemineku kriitilise epiteeli ja mesenhüümi vahelise ülemineku keerukuse uurimiseks.

MCF10A rakud kui healoomulisest proliferatiivsest rinnakust saadud mittetuumoriline epiteelirakuliin on rinnanäärme rakkude uuringutes väga olulised, andes ülevaate rinnakasvaja progresseerumisest ja kasvajarakkude dünaamikast mammosfääris. MCF10 A rakud, mida iseloomustab nende kolmemõõtmeline kasv kollageenis ja nende võime moodustada akiinseid struktuure segatud Matrigelis, pakuvad usaldusväärset mudelit onkogeenide mõju analüüsimiseks ja mammosfääri moodustumise uurimiseks, mis on ülioluline rinnanäärme eellaste omaduste ja nende rolli mõistmiseks vähiuuringutes.

MCF10A rakuliin, mis näitab basaalset fenotüüpi, ekspresseerib kombinatsiooni luminaalsetest ja tüvelistest markeritest ning epiteelirakkude markeritest, nagu tsütokeratiinid ja piimavalkud. Nende tundlikkus insuliini, glükokortikoidide, kolea enterotoksiini ja epidermise kasvufaktori (EGF) suhtes rõhutab kasvufaktorite ja hormoonide tähtsust inimese rinnanäärme rakkude proliferatsioonis ja ellujäämises.

MCF 10A mudel annab ülevaate genoomsetest signaaliradadest, mis reguleerivad rakkude käitumist ja fenotüüpi 3D-kultuuris, pakkudes platvormi immunohistokeemia ja immunofluorestsentsvärvimise jaoks, et visualiseerida rakulisi protsesse.
Need rakud on üliolulised rinnavähi arengu ajal toimuva rinnanäärme rakkude ülemineku uurimiseks, sealhulgas lipiidide oksüdatsioonitoote genotoksilisuse rolli ja selliste toitumiskomponentide nagu soja trüpsiini inhibiitori mõju rakkude toimimisele. Lisaks sellele rikastab MCF 10A rakuliini võrdlus teiste liinidega, nagu MCF7 (mis on tuumorigeenne ja östrogeeni retseptor-positiivne) ja MCF10F (teine mittetuumorigeenne, kuid teistsuguste omadustega liin), rinnavähiuuringuid, pakkudes mitmekesiseid mudeleid mitteinvasiivsete kuni tugevalt metastaatiliste fenotüüpide spektri mõistmiseks.

Kude
Rinnanäärme, rind
Sünonüümid
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Ei

04Tunnused

Viide
MCF10A (Cytioni kataloognumber 305026)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda 5% hobuse seerumiga, 20 ng/ml EGF, 0,5 mikrogrammi/ml hüdrokortisooni, 10 mikrogrammi/ml insuliini. Vajaduse korral lisage 100 ng/ml kooleratoksiini.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
36 aastat