İçeriğe atla
MCF10A
Doku
Meme bezi, meme
Eş anlamlılar
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

MCF10A

Cell line · Ürün numarası 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Fibrokistik hastalığı olan 36 yaşındaki bir kadının meme bezinden oluşturulan MCF10A insan meme epitel hücre hattı, normal meme hücresi işlevinin, dönüşümünün ve invaziv meme karsinomu geçişinde kritik olan epitelden mezenkimale geçişin inceliklerini incelemek için bir model olarak hizmet eder.

İyi huylu proliferatif meme dokusundan türetilen tümörijenik olmayan bir epitel hücre hattı olan MCF10A hücreleri, meme tümörü ilerlemesi ve mammosferlerdeki tümör hücrelerinin dinamikleri hakkında bilgiler sunarak meme hücresi çalışmalarında önemli bir rol oynamaktadır. Kolajen içinde üç boyutlu büyümeleri ve karışık Matrigel içinde asiner yapılar oluşturma yetenekleri ile karakterize edilen MCF10 A hücreleri, onkogenlerin etkisini analiz etmek ve meme progenitör hücrelerinin özelliklerini ve kanser araştırmalarındaki rollerini anlamak için çok önemli olan mammosfer oluşumunu incelemek için güvenilir bir model sağlar.

MCF10A hücre hattı, bazal benzeri bir fenotip sergilerken, luminal ve kök benzeri belirteçlerin yanı sıra sitokeratinler ve süt proteinleri gibi epitel hücre belirteçlerinin bir kombinasyonunu ifade eder. İnsülin, glukokortikoidler, kolera enterotoksini ve epidermal büyüme faktörüne (EGF) karşı duyarlılıkları, insan meme dokusu hücrelerinin çoğalması ve hayatta kalmasında büyüme faktörlerinin ve hormonların öneminin altını çizmektedir.

MCF 10A modeli, hücresel süreçleri görselleştirmek için immünohistokimya ve immünofloresan boyama için bir platform sunarak 3D kültürde hücre davranışını ve fenotipini yöneten genomik sinyal yolaklarına bir pencere açmaktadır.
Bu hücreler, lipid oksidasyon ürünü genotoksisitesinin rolü ve soya fasulyesi tripsin inhibitörü gibi diyet bileşenlerinin hücre fonksiyonu üzerindeki etkisi de dahil olmak üzere meme kanseri gelişimi sırasında meme hücrelerinin geçişini incelemek için çok önemlidir. Ayrıca, MCF 10A hücre hattının MCF7 (tümörijenik ve östrojen reseptörü pozitif) ve MCF10F (tümörijenik olmayan ancak farklı özelliklere sahip başka bir hat) gibi diğer hatlarla karşılaştırılması, invazif olmayan ve yüksek derecede metastatik fenotiplerin spektrumunu anlamak için çeşitli modeller sağlayarak meme kanseri araştırmalarını zenginleştirmektedir.

Doku
Meme bezi, meme
Eş anlamlılar
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Hayır

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MCF10A (Cytion katalog numarası 305026)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %5 at serumu, 20 ng/mL EGF, 0,5 mikrogram/mL Hidrokortizon, 10 mikrogram/mL İnsülin ile destekleyin. Gerekirse 100 ng/mL kolera toksini ekleyin.
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
36 yıl