Preskoči na vsebino
MCF10A
Tkivo
Mlečna žleza, dojka
Sinonimi
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Dokumenti

MCF10A

Cell line · Številka izdelka 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Človeška epitelijska celična linija MCF10A, pridobljena iz mlečne žleze 36-letne ženske s fibrocistično boleznijo, služi kot model za preučevanje zapletenosti normalnega delovanja celic dojke, transformacije in prehoda iz epitelija v mezenhim, ki je ključen pri prehodu v invazivni karcinom dojke.

Ker so celice MCF10A netumorigena epitelijska celična linija, pridobljena iz benignega proliferativnega tkiva dojke, so ključne pri študijah celic dojk, saj omogočajo vpogled v napredovanje tumorjev dojk in dinamiko tumorskih celic v mamosferah. Celice MCF10 A, za katere je značilna tridimenzionalna rast v kolagenu in sposobnost oblikovanja acinarnih struktur v mešanem Matrigelu, so zanesljiv model za analizo vpliva onkogenov in preučevanje nastajanja mamosfere, kar je ključno za razumevanje lastnosti progenitornih celic dojk in njihove vloge pri raziskavah raka.

Celična linija MCF10A sicer kaže bazalni fenotip, vendar izraža kombinacijo luminalnih in matičnih označevalcev ter označevalcev epitelijskih celic, kot so citokeratini in mlečni proteini. Njihova odzivnost na inzulin, glukokortikoide, enterotoksin kolere in epidermalni rastni dejavnik (EGF) poudarja pomen rastnih dejavnikov in hormonov pri proliferaciji in preživetju celic človeškega tkiva dojk.

Model MCF 10A omogoča vpogled v genomske signalne poti, ki uravnavajo obnašanje in fenotip celic v 3D-kulturi, ter ponuja platformo za imunohistokemijo in imunofluorescenčno barvanje za vizualizacijo celičnih procesov.
Te celice so ključne za preučevanje prehoda celic dojk med razvojem raka dojk, vključno z vlogo genotoksičnosti produktov lipidne oksidacije in vplivom prehranskih sestavin, kot je sojin zaviralec tripsina, na delovanje celic. Poleg tega primerjava celične linije MCF 10A z drugimi linijami, kot sta MCF7 (ki je tumorigena in pozitivna na estrogenske receptorje) in MCF10F (druga netumorigena linija, vendar z drugačnimi značilnostmi), bogati raziskave raka dojk, saj zagotavlja različne modele za razumevanje spektra neinvazivnih do zelo metastatskih fenotipov.

Tkivo
Mlečna žleza, dojka
Sinonimi
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Ne

04Identifikatorji

Navajanje vira
MCF10A (kataloška številka Cytion 305026)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišču dodajte 5 % konjskega seruma, 20 ng/ml EGF, 0,5 mikrograma/ml hidrokortizona, 10 mikrogramov/ml inzulina. Po potrebi dodajte 100 ng/ml kolera toksina.
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
36 let