MCF10A

La línea celular epitelial mamaria humana MCF10A, establecida a partir de la glándula mamaria de una mujer de 36 años con enfermedad fibroquística, sirve como modelo para estudiar las complejidades de la función normal de las células mamarias, la transformación y la transición epitelial a mesenquimal, crítica en la transición del carcinoma mamario invasivo.

Como línea celular epitelial no tumorigénica derivada de tejido mamario proliferativo benigno, las células MCF10A son fundamentales en los estudios de células mamarias, ya que ofrecen información sobre la progresión de los tumores de mama y la dinámica de las células tumorales en las mamoesferas. Las células MCF10 A, caracterizadas por su crecimiento tridimensional en colágeno y su capacidad para formar estructuras acinares en Matrigel mixto, proporcionan un modelo fiable para analizar el impacto de los oncogenes y estudiar la formación de la mammosfera, que es crucial para comprender las propiedades de las células progenitoras mamarias y su papel en la investigación del cáncer.

La línea celular MCF10A, aunque presenta un fenotipo de tipo basal, expresa una combinación de marcadores luminales y de tipo troncal, así como marcadores de células epiteliales como las citoqueratinas y las proteínas lácteas. Su capacidad de respuesta a la insulina, los glucocorticoides, la enterotoxina del cólera y el factor de crecimiento epidérmico (EGF) subraya la importancia de los factores de crecimiento y las hormonas en la proliferación y supervivencia de las células del tejido mamario humano.

El modelo MCF 10A, proporciona una ventana a las vías de señalización genómica que gobiernan el comportamiento y el fenotipo celular en cultivo 3D, ofreciendo una plataforma para la inmunohistoquímica y la tinción de inmunofluorescencia para visualizar los procesos celulares.
Estas células son cruciales para estudiar la transición de las células mamarias durante el desarrollo del cáncer de mama, incluido el papel de la genotoxicidad de los productos de la oxidación lipídica y el impacto de componentes dietéticos como el inhibidor de tripsina de la soja en la función celular. Además, la comparación de la línea celular MCF 10A con otras líneas como MCF7 (que es tumorigénica y receptora de estrógenos positiva) y MCF10F (otra línea no tumorigénica pero con características diferentes) enriquece la investigación del cáncer de mama al proporcionar modelos diversos para comprender el espectro de fenotipos no invasivos a altamente metastásicos.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía