MCF10A

Den humane mammærepitelcellelinjen MCF10A, som ble etablert fra brystkjertelen til en 36 år gammel kvinne med fibrocystisk sykdom, fungerer som en modell for å studere den kompliserte funksjonen til normale brystceller, transformasjon og overgangen fra epitel til mesenkym, som er kritisk for utviklingen av invasivt brystkreft.

MCF10A-celler er en ikke-tumorigen epitelcellelinje som stammer fra godartet, proliferativt brystvev, og de er derfor viktige i studier av brystceller, der de gir innsikt i brysttumorprogresjon og dynamikken til tumorceller i mammosfærer. MCF10A-celler, som kjennetegnes av tredimensjonal vekst i kollagen og evne til å danne akinære strukturer i blandet matrigel, er en pålitelig modell for å analysere virkningen av onkogener og studere dannelsen av mammosfærer, noe som er avgjørende for å forstå egenskapene til progenitorceller i brystcellene og deres rolle i kreftforskning.

MCF10A-cellelinjen har en basallignende fenotype, men uttrykker en kombinasjon av luminale og stamcellelignende markører, i tillegg til epitelcellemarkører som cytokeratiner og melkeproteiner. At de reagerer på insulin, glukokortikoider, kolera-enterotoksin og epidermal vekstfaktor (EGF), understreker betydningen av vekstfaktorer og hormoner for spredning og overlevelse av humane brystvevsceller.

MCF 10A-modellen gir et innblikk i de genomiske signalveiene som styrer cellenes oppførsel og fenotype i 3D-kultur, og tilbyr en plattform for immunhistokjemi og immunfluorescensfarging for å visualisere cellulære prosesser.
Disse cellene er avgjørende for å studere overgangen av brystceller under utviklingen av brystkreft, inkludert rollen til lipidoksidasjonsproduktets genotoksisitet og innvirkningen av kostholdskomponenter som trypsininhibitor fra soyabønner på cellefunksjonen. Sammenligningen av MCF 10A-cellelinjen med andre cellelinjer, som MCF7 (som er tumorigen og østrogenreseptor-positiv) og MCF10F (en annen ikke-tumorigen linje, men med andre egenskaper), beriker brystkreftforskningen ved å gi ulike modeller for å forstå spekteret av ikke-invasive til svært metastatiske fenotyper.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring