Gå direkte til indholdet
MCF10A
Væv
Brystkirtel, bryst
Synonymer
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Dokumenter

MCF10A

Cell line · Varenummer 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Den humane MCF10A-brystepitelcellelinje, der er etableret fra brystkirtlen hos en 36-årig kvinde med fibrocystisk sygdom, fungerer som en model til undersøgelse af de indviklede forhold ved normal brystcellefunktion, transformation og overgangen fra epitel til mesenkym, der er kritisk for overgangen til invasivt brystkarcinom.

Som en ikke-tumorigen epitelcellelinje, der stammer fra godartet proliferativt brystvæv, er MCF10A-celler afgørende for brystcellestudier og giver indsigt i brysttumorprogression og dynamikken i tumorceller i mammosfærer. MCF10A-celler, der er kendetegnet ved deres tredimensionelle vækst i kollagen og deres evne til at danne acinære strukturer i blandet matrigel, er en pålidelig model til at analysere virkningen af onkogener og studere mammosfæredannelsen, hvilket er afgørende for at forstå egenskaberne ved progenitorceller i brystet og deres rolle i kræftforskningen.

MCF10A-cellelinjen udviser en basallignende fænotype, men udtrykker en kombination af luminale og stamlignende markører samt epitelcellemarkører som cytokeratiner og mælkeproteiner. Deres reaktion på insulin, glukokortikoider, kolera-enterotoksin og epidermal vækstfaktor (EGF) understreger betydningen af vækstfaktorer og hormoner for spredning og overlevelse af humane brystvævsceller.

MCF 10A-modellen giver et vindue til de genomiske signalveje, der styrer celleadfærd og fænotype i 3D-kultur, og tilbyder en platform til immunhistokemi og immunfluorescensfarvning for at visualisere cellulære processer.
Disse celler er afgørende for at studere overgangen af brystceller under udviklingen af brystkræft, herunder den rolle, som genotoksicitet fra lipidoxidationsprodukter spiller, og den indvirkning, som kostkomponenter som trypsininhibitor fra sojabønner har på cellefunktionen. Desuden beriger MCF 10A-cellelinjens sammenligning med andre linjer som MCF7 (som er tumorigen og østrogenreceptorpositiv) og MCF10F (en anden ikke-tumorigen linje, men med andre egenskaber) brystkræftforskningen ved at give forskellige modeller til forståelse af spektret fra ikke-invasive til stærkt metastatiske fænotyper.

Væv
Brystkirtel, bryst
Synonymer
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Nej

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MCF10A (Cytion-katalognummer 305026)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 5 % hesteserum, 20 ng/mL EGF, 0,5 mikrogram/mL hydrokortison, 10 mikrogram/mL insulin. Tilsæt 100 ng/mL koleratoksin, hvis det er nødvendigt.
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
36 år