Skip to content
MCF10A
Tissue
בלוטת חלב, שד
Synonyms
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Documents

MCF10A

Cell line · Product number 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

קו תאי האפיתל השד האנושי MCF10A, שהוקם מבלוטת השד של אישה בת 36 הסובלת ממחלת פיברוציסטית, משמש מודל לחקר המורכבות של תפקוד תאי השד הנורמליים, השינוי שלהם והמעבר מאפיתל למזנכימלי, המהווה גורם מכריע במעבר לקרצינומה פולשנית של השד.

כתאי אפיתל לא-ממאירים שמקורם ברקמת שד שפירה, תאי MCF10A משמשים ככלי חשוב במחקרים על תאי שד, ומספקים תובנות על התקדמות גידולים בשד ועל הדינמיקה של תאי הגידול במאמוספירות. תאי MCF10 A, המאופיינים בצמיחה תלת-ממדית בקולגן וביכולתם ליצור מבנים אצינריים במטריג'ל מעורב, מספקים מודל אמין לניתוח ההשפעה של אונקוגנים ולמחקר היווצרות הממוספירה, החיונית להבנת תכונות תאי האב של השד ותפקידם במחקר הסרטן.

קו התאים MCF10A, תוך שהוא מציג פנוטיפ דמוי בסיס, מבטא שילוב של סמנים לומנליים ודמויי גזע, כמו גם סמנים של תאי אפיתל כגון ציטוקרטין וחלבוני חלב. תגובתם לאינסולין, גלוקוקורטיקואידים, אנטרוטוקסין כולרה ופקטור גדילה אפידרמלי (EGF) מדגישה את חשיבותם של גורמי גדילה והורמונים בהתפשטות ובהישרדות של תאי רקמת השד האנושית.

מודל MCF 10A מספק הצצה למסלולי האיתות הגנומיים השולטים בהתנהגות התאים ובפנוטיפ בתרבית תלת-ממדית, ומציע פלטפורמה לצביעת אימונוהיסטוכימיה ואימונופלואורסצנציה להדמיה של תהליכים תאיים.
תאים אלה חיוניים לחקר המעבר של תאי השד במהלך התפתחות סרטן השד, כולל תפקידם של תוצרי חמצון השומנים בגנוטוקסיות והשפעתם של מרכיבים תזונתיים כמו מעכב טריפסין סויה על תפקוד התאים. יתר על כן, ההשוואה בין קו התאים MCF 10A לקווים אחרים כגון MCF7 (שהוא טומורגני וחיובי לקולטני אסטרוגן) ו-MCF10F (קו נוסף שאינו טומורגני אך בעל מאפיינים שונים) מעשירה את המחקר על סרטן השד על ידי מתן מודלים מגוונים להבנת הספקטרום של פנוטיפים לא פולשניים ועד פנוטיפים גרורתיים ביותר.

Tissue
בלוטת חלב, שד
Synonyms
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Tumourigenic
לא

04Identifiers

Citation
MCF10A (מספר קטלוג Cytion 305026)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 5% סרום סוסים, 20 נ"ג/מ"ל EGF, 0.5 מיקרוגרם/מ"ל הידרוקורטיזון, 10 מיקרוגרם/מ"ל אינסולין. הוסף 100 נ"ג/מ"ל רעלן כולרה במידת הצורך.
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
36 שנים