
- Tissue
- 乳腺、乳房
- Synonyms
- MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A
Documents
01General information
- Description
MCF10A 人乳腺上皮細胞系,係從一名患有纖維囊性疾病的 36 歲女性之乳腺中建立,用作研究正常乳腺細胞功能、轉化,以及在侵襲性乳腺癌轉化過程中至關重要的上皮-間質轉化等複雜機制的模型。
作為源自良性增生性乳腺組織的非致瘤性上皮細胞系,MCF10A 細胞在乳腺細胞研究中扮演關鍵角色,有助於深入了解乳腺腫瘤的進展以及腫瘤細胞在乳腺球中的動態變化。 MCF10A 細胞以其在膠原蛋白中進行三維生長,以及在混合 Matrigel 中形成小葉結構的能力為特徵,為分析致癌基因的影響及研究乳腺球體形成提供了可靠的模型,這對於理解乳腺前體細胞的特性及其在癌症研究中的作用至關重要。
MCF10A 細胞系雖呈現基底樣表型,但同時表達管腔型與幹細胞樣標記物,以及細胞角蛋白和乳蛋白等上皮細胞標記物。 該細胞系對胰島素、糖皮質激素、霍亂腸毒素及表皮生長因子(EGF)的反應性,凸顯了生長因子與激素在人類乳腺組織細胞增殖與存活中的重要性。
MCF 10A 模型為了解在三維培養中調節細胞行為與表型的基因組訊號傳導路徑提供了一扇窗口,並為透過免疫組織化學和免疫螢光染色來可視化細胞過程提供了平台。
這些細胞對於研究乳腺癌發展過程中乳腺細胞的轉變至關重要,包括脂質氧化產物的基因毒性作用,以及大豆胰蛋白酶抑制劑等膳食成分對細胞功能的影響。 此外,將 MCF 10A 細胞系與其他細胞系(例如 MCF7(具有致瘤性且雌激素受體陽性)和 MCF10F (另一種非致瘤性細胞系,但具有不同特性)的比較,透過提供多樣化的模型來理解從非侵入性到高度轉移性表型的全譜,從而豐富了乳癌研究。- Tissue
- 乳腺、乳房
- Synonyms
- MCF-10A
- MCF 10A
- MCF.10A
- MCF10A
- MCF10-A
- MCF10a
- MCF-10 Attached
- Michigan Cancer Foundation-10A
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮性
- Tumourigenic
- 不
04Identifiers
- Citation
- MCF10A(Cytion 型號 305026)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0598
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 5% 馬血清、20 ng/mL EGF、0.5 微克/mL 氫化可的松及 10 微克/mL 胰島素。如有需要,可加入 100 ng/mL 霍亂毒素。
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 36年
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
