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MCF10A
Tissue
乳腺、乳房
Synonyms
MCF-10A, MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

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MCF10A

Cell line · Product number 305026

The MCF10A human mammary epithelial cell line, established from the mammary gland of a 36-year-old female with fibrocystic disease, serves as a model for ...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

MCF10A 人乳腺上皮細胞系,係從一名患有纖維囊性疾病的 36 歲女性之乳腺中建立,用作研究正常乳腺細胞功能、轉化,以及在侵襲性乳腺癌轉化過程中至關重要的上皮-間質轉化等複雜機制的模型。

作為源自良性增生性乳腺組織的非致瘤性上皮細胞系,MCF10A 細胞在乳腺細胞研究中扮演關鍵角色,有助於深入了解乳腺腫瘤的進展以及腫瘤細胞在乳腺球中的動態變化。 MCF10A 細胞以其在膠原蛋白中進行三維生長,以及在混合 Matrigel 中形成小葉結構的能力為特徵,為分析致癌基因的影響及研究乳腺球體形成提供了可靠的模型,這對於理解乳腺前體細胞的特性及其在癌症研究中的作用至關重要。

MCF10A 細胞系雖呈現基底樣表型,但同時表達管腔型與幹細胞樣標記物,以及細胞角蛋白和乳蛋白等上皮細胞標記物。 該細胞系對胰島素、糖皮質激素、霍亂腸毒素及表皮生長因子(EGF)的反應性,凸顯了生長因子與激素在人類乳腺組織細胞增殖與存活中的重要性。

MCF 10A 模型為了解在三維培養中調節細胞行為與表型的基因組訊號傳導路徑提供了一扇窗口,並為透過免疫組織化學和免疫螢光染色來可視化細胞過程提供了平台。
這些細胞對於研究乳腺癌發展過程中乳腺細胞的轉變至關重要,包括脂質氧化產物的基因毒性作用,以及大豆胰蛋白酶抑制劑等膳食成分對細胞功能的影響。 此外,將 MCF 10A 細胞系與其他細胞系(例如 MCF7(具有致瘤性且雌激素受體陽性)和 MCF10F (另一種非致瘤性細胞系,但具有不同特性)的比較,透過提供多樣化的模型來理解從非侵入性到高度轉移性表型的全譜,從而豐富了乳癌研究。

Tissue
乳腺、乳房
Synonyms
  • MCF-10A
  • MCF 10A
  • MCF.10A
  • MCF10A
  • MCF10-A
  • MCF10a
  • MCF-10 Attached
  • Michigan Cancer Foundation-10A

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮性
Tumourigenic
不

04Identifiers

Citation
MCF10A(Cytion 型號 305026)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0598

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 5% 馬血清、20 ng/mL EGF、0.5 微克/mL 氫化可的松及 10 微克/mL 胰島素。如有需要,可加入 100 ng/mL 霍亂毒素。
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Donor age
36年