Mine otse sisu juurde
MCF-7 rakud
Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
MCF 7, MCF.7, MCF7, Michigan Cancer Foundation-7, ssMCF-7, ssMCF7, MCF7/WT, MCF7-CTRL, IBMF-7

Dokumendid

MCF-7 rakud

Cell line · Toote number 300273

MCF7-rakke, mis on inimese rinnavähi uurimisel laialt kasutatav uurimismudel, kasutatakse ulatuslikult hormoonsõltuva rinnavähi in vitro mudelina...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MCF7 rakke, mida kasutatakse laialdaselt inimese rinnavähi uurimisel, kasutatakse laialdaselt hormoonsõltuva rinnavähi in vitro mudelina. Metastaatilise adenokartsinoomiga 69-aastase valge naisterahva rinnanäärme koest pärinevad MCF7-rakud on laialdaselt kasutatav in vitro mudel hormoonsõltuva rinnavähi jaoks, mis peegeldab A-luminaalset alatüüpi. Seda alatüüpi iseloomustab madalam aste ja parem prognoos võrreldes rinnanäärmevähi agressiivsemate vormidega.

Rinnavähi uurimisel on MCF 7 rakud olulised rinnavähiravimite tõhususe hindamisel ja rinnavähi tüvirakkude dünaamika mõistmisel. Nad on vähiuuringute jaoks keskse tähtsusega, kuna nad on võrdlusmudeliks agressiivsemate rakuliinide, nagu MDA-MB-231, vastu.

Ravimite, nagu tamoksifeen ja doksorubitsiin, uurimine on oluline hormoonsõltuvate rinnavähivormide ravimiuuringutes ning nende toime- ja resistentsusmehhanismide tundmaõppimisel. Samamoodi pakub märkimisväärset huvi östradiooli roll nende rakkude kasvu ja omaduste moduleerimisel, arvestades selle tähtsust hormoonidele reageerivate rinnavähivormide puhul.

MCF7 rinnavähi rakuliini kasutavates uuringutes uuritakse sageli tsütotoksilisuse ja apoptoosi rakuprotsesse, eriti vastuseks sellistele vähivastastele ainetele nagu kurkumiin, mis on tuntud oma potentsiaali poolest vähktõve ennetamisel. Immuunivastuste, sealhulgas tuumornekroosifaktor alfa (TNF alfa) ja bakteriaalsete antigeenide mõju uurimine rikastab veelgi meie arusaamist kasvaja mikrokeskkonnast ja võimalikest terapeutilistest sihtmärkidest.

MCF7 rakke uuritakse hoolikalt nii 2D-rakukultuuris kui ka 3D-rakukultuurisüsteemides, sealhulgas sferoidikultuuris, et jäljendada täpsemalt kasvajate mikrokeskkonda. Need meetodid võimaldavad põhjalikumalt uurida rakkude sferoidide kasvu ja vähi tüvirakkude käitumist mikrokudedes tellingutel põhinevates süsteemides.

MCF7 rakuliin, mille epiteelirakkude omadused ja sarnasus inimese adenokartsinoomirakkudega on vähiuuringute nurgakivi. See hõlbustab mitte ainult rinnavähiravimite ja nende mehhanismide uurimist, vaid ka laiemat mõju vähiravile, sealhulgas mesenhüümiliste tüvirakkude võimalikku rolli ja sihtotstarbeliste ravimeetodite tõhusust in vivo uuringutes.

Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • MCF 7
  • MCF.7
  • MCF7
  • Michigan Cancer Foundation-7
  • ssMCF-7
  • ssMCF7
  • MCF7/WT
  • MCF7-CTRL
  • IBMF-7

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Tüveline kromosoomide arv ulatus hüpertriploidsusest kuni hüpotetraploidsuseni, kusjuures 2S-komponent esines 1% ulatuses. S-metafaasi kohta oli 29 kuni 34 marker-kromosoomi, 24 kuni 28 markerit esines vähemalt 30% rakkudest ning üldiselt oli üks suur submetatsentriline (M1) ja 3 suurt subtelotsentrilist (M2, M3 ja M4) markerit äratuntavad üle 80% metafaasidest. DM-i ei tuvastatud. Kromosoom 20 oli nullisoomne ja x oli disoomne. Fenotüübi sageduse toode: 0.0154
Kahekordistumisaeg
24 tundi

04Tunnused

Viide
MCF-7 (Cytioni katalooginumber 300273)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0031

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Rakud ekspresseerivad nii metsikut tüüpi kui ka varieeruvaid östrogeeni retseptoreid ja progesterooni retseptorit.
Valgu ekspressioon
P53 negatiivne, pGP9.5 negatiivne, CEA positiivne
Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Onkogeenid
Wnt7h +, Tx-4
Mutatsiooniprofiil
TP53 wt
Tooted
Insuliinitaolise kasvufaktori seonduvad valgud (IGFBP) BP-2, BP-4, BP-5

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel pärast sulatamist 48 tundi puhata
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
69 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia