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MCF-7-Zellen
Gewebe
Brust
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
MCF 7, MCF.7, MCF7, Michigan Cancer Foundation-7, ssMCF-7, ssMCF7, MCF7/WT, MCF7-CTRL, IBMF-7

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MCF-7-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300273

MCF7-Zellen, ein weit verbreitetes Forschungsmodell in der Erforschung des menschlichen Brustkrebses, werden in großem Umfang als In-vitro-Modell für hormonabhängigen Brustkrebs eingesetzt...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MCF7-Zellen, ein weit verbreitetes Forschungsmodell in der Erforschung von menschlichem Brustkrebs, werden in großem Umfang als In-vitro-Modell für hormonabhängigen Brustkrebs verwendet. MCF7-Zellen, die aus dem Brustgewebe einer 69-jährigen weißen Frau mit metastasierendem Adenokarzinom stammen, sind ein weit verbreitetes In-vitro-Modell für hormonabhängigen Brustkrebs und spiegeln den Subtyp Luminal A wider. Dieser Subtyp zeichnet sich durch einen niedrigeren Grad und eine bessere Prognose im Vergleich zu aggressiveren Formen von Brustkrebs aus.

In der Brustkrebsforschung sind MCF-7-Zellen von entscheidender Bedeutung für die Bewertung der Wirksamkeit von Brustkrebsmedikamenten und das Verständnis der Dynamik von Brustkrebsstammzellen. Sie sind von zentraler Bedeutung für die Krebsforschung und dienen als Vergleichsmodell zu aggressiveren Zelllinien wie MDA-MB-231.

Die Untersuchung therapeutischer Wirkstoffe wie Tamoxifen und Doxorubicin ist von entscheidender Bedeutung für die Erforschung von Medikamenten gegen hormonabhängigen Brustkrebs und für die Gewinnung von Erkenntnissen über die Wirkungs- und Resistenzmechanismen. Auch die Rolle von Östradiol bei der Modulation des Wachstums und der Eigenschaften dieser Zellen ist angesichts seiner Bedeutung für hormonabhängige Brustkrebsarten von großem Interesse.

Die Forschung an der Brustkrebszelllinie MCF7 befasst sich häufig mit den zellulären Prozessen der Zytotoxizität und Apoptose, insbesondere als Reaktion auf Krebsmittel wie Curcumin, das für sein Potenzial zur Krebsprävention bekannt ist. Die Untersuchung von Immunreaktionen, einschließlich der Wirkung des Tumor-Nekrose-Faktors alpha (TNF alpha) und der Auswirkungen bakterieller Antigene, bereichert unser Verständnis der Mikroumgebung des Tumors und potenzieller therapeutischer Ziele zusätzlich.

MCF7-Zellen werden sowohl in 2D-Zellkulturen als auch in 3D-Zellkultursystemen, einschließlich Sphäroid-Kulturen, sorgfältig untersucht, um die Mikroumgebung von Tumoren besser zu imitieren. Diese Methoden ermöglichen eine gründlichere Untersuchung des Sphäroidwachstums von Zellen und des Verhaltens von Krebsstammzellen innerhalb von Mikrogeweben in gerüstbasierten Systemen.

Die MCF7-Zelllinie mit ihren epithelialen Zelleigenschaften und ihrer Ähnlichkeit mit menschlichen Adenokarzinomzellen ist ein Eckpfeiler der Krebsforschung. Sie erleichtert nicht nur die Erforschung von Brustkrebsmedikamenten und deren Mechanismen, sondern auch die weitergehenden Auswirkungen auf die Krebsbehandlung, einschließlich der potenziellen Rolle von mesenchymalen Stammzellen und der Wirksamkeit gezielter Therapien in vivo-Studien.

Gewebe
Brust
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • MCF 7
  • MCF.7
  • MCF7
  • Michigan Cancer Foundation-7
  • ssMCF-7
  • ssMCF7
  • MCF7/WT
  • MCF7-CTRL
  • IBMF-7

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen
Karyotyp
Die Stammlinien-Chromosomenzahl reichte von Hypertriploidie bis Hypotetraploidie, wobei die 2S-Komponente bei 1 % auftrat. Es gab 29 bis 34 Markerchromosomen pro S-Metaphase, 24 bis 28 Marker traten in mindestens 30 % der Zellen auf, und im Allgemeinen waren in über 80 % der Metaphasen ein großer submetazentrischer (M1) und drei große subtelozentrische (M2, M3 und M4) Marker zu erkennen. Es wurden keine DM entdeckt. Chromosom 20 war nullisomisch und x war disomisch. Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0154
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MCF-7 (Cytion Katalognummer 300273)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0031

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Die Zellen exprimieren den Wildtyp und die Variante des Östrogenrezeptors sowie den Progesteronrezeptor.
Proteinexpression
P53 negativ, pGP9.5 negativ, CEA positiv
Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Onkogene
Wnt7h +, Tx-4
Mutationsprofil
TP53 wt
Produkte
Insulinähnliche Wachstumsfaktor-Bindungsproteine (IGFBP) BP-2, BP-4, BP-5

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Lassen Sie die Zellen nach dem Auftauen 48 Stunden lang ruhen
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
69 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch