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MDA-MB-436-Zellen
Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
MDA_MB_436, MDA MB 436, MDA-Mb-436, MDA-MB436, MDAMB436, MDA-436, MDA436, MB436, MD Anderson-Metastatic Breast-436

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MDA-MB-436-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300278

Die Zelllinie MDA-MB-436 stammt aus einem humanen Brustadenokarzinom. Diese Zelllinie zeichnet sich durch ihren Phänotyp des dreifach-negativen Brustkrebses (TNBC) aus...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie MDA-MB-436 stammt von einem menschlichen Brust-Adenokarzinom ab. Diese Zelllinie zeichnet sich durch einen dreifach negativen Brustkrebs-Phänotyp (TNBC) aus, bei dem der Östrogenrezeptor (ER), der Progesteronrezeptor (PR) und der humane epidermale Wachstumsfaktor-Rezeptor 2 (HER2) fehlen. Diese Eigenschaften machen ihn zu einem unschätzbaren Modell für die Untersuchung von TNBC, einem besonders aggressiven und schwer zu behandelnden Subtyp von Brustkrebs. Die Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und sind für ihre starke Proliferationsfähigkeit in vitro bekannt.

Genetisch gesehen weisen MDA-MB-436-Zellen Mutationen in wichtigen krebsrelevanten Genen auf, darunter BRCA1 und TP53. Die BRCA1-Mutation ist von besonderem Interesse, da sie die genetischen Veränderungen widerspiegelt, die bei einer Untergruppe von erblichen Brustkrebserkrankungen gefunden werden. Dies macht MDA-MB-436 zu einem wichtigen Instrument für die Untersuchung der Mechanismen, die der BRCA1-assoziierten Tumorentstehung zugrunde liegen, und für die Erprobung potenzieller therapeutischer Strategien, die auf diese Mechanismen abzielen. Darüber hinaus wurde die Zelllinie in der Forschung eingesetzt, die sich auf Chemotherapieresistenz, Metastasierung und die Mikroumgebung des Tumors konzentriert.

Forscher, die mit MDA-MB-436-Zellen arbeiten, profitieren von ihren gut dokumentierten Eigenschaften, die reproduzierbare und zuverlässige Versuchsergebnisse ermöglichen. Studien mit dieser Zelllinie leisten einen wichtigen Beitrag zum Verständnis der Biologie von TNBC und zur Entwicklung neuer Behandlungsmethoden für diesen schwierigen Krebstyp. Allerdings ist bei der Versuchsplanung Vorsicht geboten, da das Fehlen von Hormonrezeptoren und HER2-Expression im Vergleich zu anderen Brustkrebsmodellen alternative Ansätze erfordert.

Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • MDA_MB_436
  • MDA MB 436
  • MDA-Mb-436
  • MDA-MB436
  • MDAMB436
  • MDA-436
  • MDA436
  • MB436
  • MD Anderson-Metastatic Breast-436

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Pleomorphe und multinukleäre Zellen

04Bezeichner

Quellenangabe
MDA-MB-436 (Cytion-Katalognummer 300278)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0623

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
43 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch