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MDA-MB-453
Gewebe
Brustdrüse, Brust
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Perikarderguss
Synonyme
MDA-MB 453, MDA MB 453, MDA-MB453, MDAMB453, MDA-453, MDA453, MD Anderson-Metastatic Breast-453

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MDA-MB-453

Cell line · Artikelnummer 305042

The MDA-MB-453 cell line is a widely studied human breast carcinoma cell line derived from the metastatic site of pleural effusion in a female adult patie...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die MDA-MB-453-Zelllinie ist eine weithin untersuchte humane Brustkrebs-Zelllinie, die aus der metastatischen Stelle eines Pleuraergusses bei einer erwachsenen Patientin stammt. Diese Zelllinie ist für ihren Nutzen in der Brustkrebsforschung bekannt, da sie einzigartige Merkmale aufweist, darunter die Positivität des Androgenrezeptors (AR) und das Fehlen der Expression des Östrogenrezeptors (ER) und des Progesteronrezeptors (PR). Diese Eigenschaften machen MDA-MB-453 zu einem unschätzbaren Modell für die Untersuchung von dreifach negativem Brustkrebs (TNBC) und der Rolle von Androgenrezeptoren bei der Progression und Therapieresistenz von Brustkrebs.

MDA-MB-453-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf, haften an der Kulturoberfläche und bilden polygonale Zellformen. Die Zelllinie zeichnet sich außerdem durch eine hohe Proliferationsfähigkeit und die Fähigkeit aus, in vitro und in vivo zu wachsen, was für präklinische Studien zur Prüfung von Arzneimitteln und zur Untersuchung der molekularen Signalwege von wesentlicher Bedeutung ist. Bei der genetischen Analyse von MDA-MB-453-Zellen werden Mutationen in wichtigen Onkogenen und Tumorsuppressoren festgestellt, darunter das PIK3CA-Gen, das häufig am Überleben und Wachstum von Krebszellen beteiligt ist. Diese Zellen werden auch für die Untersuchung gezielter Therapien verwendet, insbesondere für solche, die auf den PI3K/AKT/mTOR-Signalweg und AR-Inhibitoren abzielen, um wirksamere Behandlungen für TNBC-Patienten zu entwickeln.

Gewebe
Brustdrüse, Brust
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Perikarderguss
Synonyme
  • MDA-MB 453
  • MDA MB 453
  • MDA-MB453
  • MDAMB453
  • MDA-453
  • MDA453
  • MD Anderson-Metastatic Breast-453

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Nein

04Bezeichner

Quellenangabe
MDA-MB-453 (Cytion-Katalognummer 305042)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0418

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Fibroblasten-Wachstumsfaktor (FGF), exprimiert

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
48 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch