Pāriet uz saturu
MDA-MB-453
Audums
Krūts dziedzeris, krūts
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Perikarda izsvīdums
Sinonīmi
MDA-MB 453, MDA MB 453, MDA-MB453, MDAMB453, MDA-453, MDA453, MD Anderson-Metastatic Breast-453

Dokumenti

MDA-MB-453

Cell line · Preces numurs 305042

The MDA-MB-453 cell line is a widely studied human breast carcinoma cell line derived from the metastatic site of pleural effusion in a female adult patie...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDA-MB-453 šūnu līnija ir plaši pētīta cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no metastātiskas pleiras izplūdes vietas pieaugušai sievietei. Šī šūnu līnija ir pazīstama ar savu lietderību krūts vēža pētījumos, pateicoties tās unikālajām īpašībām, tostarp androgēnu receptoru (AR) pozitīvumam un estrogēnu receptoru (ER) un progesterona receptoru (PR) ekspresijas trūkumam. Šīs īpašības padara MDA-MB-453 par nenovērtējamu modeli trīskārši negatīvā krūts vēža (TNBC) un androgēnu receptoru lomas krūts vēža progresēšanā un terapijas rezistences pētījumos.

MDA-MB-453 šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju un piestiprinās pie kultūras virsmām, veidojot daudzstūra formas šūnas. Šūnu līnija raksturojas arī ar augstu proliferatīvo spēju un spēju augt in vitro un in vivo, kas ir būtiski pirmsklīniskajos pētījumos, kuros tiek testēti medikamenti un pētīti molekulārie ceļi. MDA-MB-453 šūnu ģenētiskā analīze atklāj mutācijas galvenajos onkogēnos un audzēju supresoros, tostarp PIK3CA gēnā, kas bieži ir saistīts ar vēža šūnu izdzīvošanu un augšanu. Šīs šūnas tiek izmantotas arī mērķtiecīgu terapiju pētījumos, jo īpaši tajos, kas vērsti uz PI3K/AKT/mTOR signālceļu un AR inhibitoriem, lai izstrādātu efektīvākus ārstēšanas veidus TNBC pacientiem.

Audums
Krūts dziedzeris, krūts
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Perikarda izsvīdums
Sinonīmi
  • MDA-MB 453
  • MDA MB 453
  • MDA-MB453
  • MDAMB453
  • MDA-453
  • MDA453
  • MD Anderson-Metastatic Breast-453

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
MDA-MB-453 (Cytion kataloga numurs 305042)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0418

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Fibroblastu augšanas faktors (FGF), izteikts

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
48 gadi
Etniskā piederība
Eiropas