Gå til innholdet
MDA-MB-435S-celler
Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Høyre rumpe, underhud (primært melanom med opprinnelse i M14)
Synonymer
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Dokumenter

MDA-MB-435S-celler

Cell line · Produktnummer 300277

Ansvarsfraskrivelse: Den aktuelle cellelinjen er blitt identifisert som problematisk på grunn av forurensningsproblemer. Nærmere bestemt er stamcellelinjen (MDA-MB-4...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: Den aktuelle cellelinjen har blitt identifisert som problematisk på grunn av kontamineringsproblemer. Det har vist seg at den opprinnelige cellelinjen (MDA-MB-435) er et derivat av M14-cellelinjen.

MDA-MB-435S-cellelinjen er en mye brukt modell i kreftforskning, og man trodde opprinnelig at den stammet fra en brystkreftmetastase. Disse cellene har egenskaper som er typiske for svært aggressive kreftceller, blant annet rask spredning, motstand mot apoptose og evne til å invadere omkringliggende vev. På grunn av disse egenskapene blir MDA-MB-435S-celler ofte brukt i studier som undersøker kreftmetastaser, resistensmekanismer og de molekylære forutsetningene for aggressiv tumoratferd.

Senere molekylære og genetiske analyser har imidlertid avdekket at MDA-MB-435S-celler har en genetisk profil som ligger nærmere melanom enn brystkreft, noe som har fått betydelige konsekvenser for bruken av dem i forskning. Til tross for denne kontroversen er de fortsatt en verdifull modell for å studere metastatiske prosesser og teste potensielle terapeutiske midler, særlig de som retter seg mot mekanismer som er felles for både brystkreft og melanom. Forskere anbefales å ta hensyn til disse genetiske funnene når de tolker resultater fra studier som involverer MDA-MB-435S-celler.

Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Høyre rumpe, underhud (primært melanom med opprinnelse i M14)
Søknader
Forskning på metastaser og invasjon; kontroversmodell for melanom og brystkreft; mekanismer for legemiddelresistens; svulstbiologi; preklinisk farmakologisk screening
Synonymer
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
Uten GMO
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDA-MB-435S (Cytion katalognummer 300277)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 5 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
33 år
Etnisitet
Europeisk