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Cellules MDA-MB-435S
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Fesse droite, hypoderme (mélanome primaire / d'origine M14)
Synonymes
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Documents

Cellules MDA-MB-435S

Cell line · Référence du produit 300277

Avertissement : la lignée cellulaire en question a été identifiée comme problématique en raison de problèmes de contamination. Plus précisément, la lignée cellulaire parente (MDA-MB-4...

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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

Avertissement : La lignée cellulaire en question a été identifiée comme problématique en raison de problèmes de contamination. Plus précisément, il a été démontré que la lignée cellulaire parentale (MDA-MB-435) est un dérivé de la lignée cellulaire M14.

La lignée cellulaire MDA-MB-435S est un modèle largement utilisé dans la recherche sur le cancer, que l'on pensait à l'origine dérivé d'une métastase de cancer du sein. Ces cellules présentent des caractéristiques typiques des cellules cancéreuses très agressives, notamment un taux de prolifération rapide, une résistance à l'apoptose et la capacité d'envahir les tissus environnants. En raison de ces caractéristiques, les cellules MDA-MB-435S sont fréquemment utilisées dans les études portant sur les métastases du cancer, les mécanismes de résistance aux médicaments et les fondements moléculaires du comportement agressif des tumeurs.

Il est intéressant de noter que des analyses moléculaires et génétiques ultérieures ont révélé que les cellules MDA-MB-435S ont un profil génétique plus proche du mélanome que du cancer du sein, ce qui a des conséquences importantes sur leur utilisation dans la recherche. Malgré cette controverse, les cellules MDA-MB-435S restent un modèle précieux pour étudier les processus métastatiques et tester des agents thérapeutiques potentiels, en particulier ceux qui ciblent des mécanismes communs au cancer du sein et au mélanome. Il est conseillé aux chercheurs de tenir compte de ces résultats génétiques lorsqu'ils interprètent les résultats obtenus dans le cadre d'études portant sur les cellules MDA-MB-435S.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Fesse droite, hypoderme (mélanome primaire / d'origine M14)
Applications
Recherche sur les métastases et l'invasion ; modèle de controverse entre le mélanome et le cancer du sein ; mécanismes de résistance aux médicaments ; biologie tumorale ; criblage pharmacologique préclinique
Synonymes
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales

04Identifiants

Référence
MDA-MB-435S (numéro de catalogue Cytion 300277)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 5% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
33 ans
Origine ethnique
Européen