Skip to content
เซลล์ MDA-MB-435S
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ก้นขวา, ชั้นใต้ผิวหนัง (มะเร็งเมลาโนมาขั้นต้น/ต้นกำเนิด M14)
Synonyms
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Documents

เซลล์ MDA-MB-435S

Cell line · Product number 300277

Disclaimer: The cell line in question has been identified as problematic due to contamination issues. Specifically, the parent cell line (MDA-MB-4...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

ข้อจำกัดความรับผิดชอบ: สายเซลล์ที่กล่าวถึงนี้ได้รับการระบุว่ามีปัญหาเนื่องจากปัญหาการปนเปื้อน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สายเซลล์ต้นกำเนิด (MDA-MB-435) ได้แสดงให้เห็นว่าเป็นอนุพันธ์ของสายเซลล์ M14

สายเซลล์ MDA-MB-435S เป็นแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง ซึ่งเดิมเชื่อว่ามีต้นกำเนิดมาจากการแพร่กระจายของมะเร็งเต้านม เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์มะเร็งที่มีความก้าวร้าวสูง รวมถึงอัตราการเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็ว ความต้านทานต่อการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และความสามารถในการรุกรานเนื้อเยื่อโดยรอบเนื่องจากลักษณะเหล่านี้ เซลล์ MDA-MB-435S จึงถูกนำมาใช้บ่อยครั้งในการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับการแพร่กระจายของมะเร็ง กลไกการดื้อยา และรากฐานระดับโมเลกุลของพฤติกรรมเนื้องอกที่ก้าวร้าว

ที่น่าสนใจคือ การวิเคราะห์ทางโมเลกุลและพันธุกรรมในภายหลังได้เปิดเผยว่า เซลล์ MDA-MB-435S มีโปรไฟล์ทางพันธุกรรมที่ใกล้เคียงกับมะเร็งผิวหนังเมลาโนมามากกว่ามะเร็งเต้านม ซึ่งก่อให้เกิดนัยสำคัญต่อการนำไปใช้ในงานวิจัย แม้จะมีความขัดแย้งนี้ เซลล์เหล่านี้ยังคงเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการแพร่กระจายของมะเร็งและการทดสอบสารบำบัดที่มีศักยภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสารที่มุ่งเป้าไปที่กลไกร่วมกันระหว่างมะเร็งเต้านมและมะเร็งผิวหนังเมลาโนมานักวิจัยควรพิจารณาข้อมูลทางพันธุกรรมเหล่านี้เมื่อทำการตีความผลการวิจัยที่ได้จากการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ MDA-MB-435S

Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ก้นขวา, ชั้นใต้ผิวหนัง (มะเร็งเมลาโนมาขั้นต้น/ต้นกำเนิด M14)
Applications
การวิจัยเกี่ยวกับการแพร่กระจายและการรุกรานของเซลล์มะเร็ง; แบบจำลองความขัดแย้งระหว่างมะเร็งเมลาโนมาและมะเร็งเต้านม; กลไกการต้านทานยา; ชีววิทยาของเนื้องอก; การคัดกรองทางเภสัชวิทยาในระยะก่อนคลินิก
Synonyms
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
MDA-MB-435S (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300277)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
33 ปี
Ethnicity
ยุโรป