Přejít na obsah
Buňky MDA-MB-435S
Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Pravá hýžď, podkoží (primární melanom / původ M14)
Synonyma
MDA-MB-435s, MDA-MB-435 S, MDA-MB-435-S, MDAMB435S, BrCL15

Dokumenty

Buňky MDA-MB-435S

Cell line · Číslo výrobku 300277

Upozornění: Uvedená buněčná linie byla označena za problematickou z důvodu kontaminace. Konkrétně se jedná o mateřskou buněčnou linii (MDA-MB-4...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Upozornění: Dotyčná buněčná linie byla označena za problematickou z důvodu kontaminace. Konkrétně se ukázalo, že mateřská buněčná linie (MDA-MB-435) je derivátem buněčné linie M14.

Buněčná linie MDA-MB-435S je široce využívaným modelem ve výzkumu rakoviny, o němž se původně předpokládalo, že pochází z metastázy rakoviny prsu. Tyto buňky vykazují vlastnosti typické pro vysoce agresivní nádorové buňky, včetně rychlé proliferace, odolnosti vůči apoptóze a schopnosti invadovat do okolních tkání. Díky těmto vlastnostem se buňky MDA-MB-435S často používají ve studiích zkoumajících metastázy rakoviny, mechanismy rezistence vůči lékům a molekulární základy agresivního chování nádorů.

Zajímavé je, že následné molekulární a genetické analýzy odhalily, že buňky MDA-MB-435S mají blíže ke genetickému profilu melanomu než ke karcinomu prsu, což má významné důsledky pro jejich využití ve výzkumu. Navzdory této kontroverzi zůstávají cenným modelem pro studium metastatických procesů a testování potenciálních terapeutických látek, zejména těch, které cílí na mechanismy společné pro karcinom prsu i melanom. Výzkumníkům se doporučuje, aby při interpretaci výsledků získaných ze studií s buňkami MDA-MB-435S brali v úvahu tyto genetické poznatky.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Pravá hýžď, podkoží (primární melanom / původ M14)
Aplikace
Výzkum metastáz a invaze; model kontroverze ohledně melanomu a rakoviny prsu; mechanismy lékové rezistence; biologie nádorů; předklinický farmakologický screening
Synonyma
  • MDA-MB-435s
  • MDA-MB-435 S
  • MDA-MB-435-S
  • MDAMB435S
  • BrCL15

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; problematic line — parental MDA-MB-435 identified as M14 melanoma derivative; use with appropriate caution and cite genetic identity
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky

04Identifikátory

Citace
MDA-MB-435S (katalogové číslo Cytion 300277)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0622

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 5 % FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
33 let
Etnická příslušnost
Evropská