İçeriğe atla
HARA-B
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer skuamöz hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
HARAB

HARA-B

Cell line · Ürün numarası 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HARA-B hücre hattı, özellikle bir fare modelinde metastatik kemik dokusundan oluşturulan insan akciğer skuamöz hücreli karsinomundan türetilmiştir. Bu hücre hattı, orijinal HARA hücre hattından ikincil bir gelişmedir ve bu hücrelerde gözlenen yaygın kemik metastazında önemli bir rol oynayan yüksek paratiroid hormonu ile ilişkili protein (PTHrP) ekspresyonu ile karakterize edilir. HARA-B hattı, akciğer kanseri ile ilişkili kemik metastazı mekanizmalarının incelenmesinde etkili olmuştur.

HARA-B'yi içeren bilimsel çalışmalar genellikle akciğer kanseri de dahil olmak üzere bazı kanserlerle ilişkili yaygın bir paraneoplastik sendrom olan hiperkalseminin modellenmesindeki faydasına odaklanmaktadır. Bu modeldeki hiperkalsemi, hücrelerin hipodermik transplantasyonu ile indüklenir ve kanser hücreleri ile kemik hücreleri arasındaki etkileşimlerin yanı sıra kemik yıkımı ve kalsiyum salınımına yol açan yolların anlaşılması için değerli bir araç sağlar. Bu hücre hattı, araştırmacıların akciğer kanseri hastalarında kemik metastazını ve ilişkili komplikasyonları azaltmaya yönelik potansiyel terapötik stratejileri araştırmasına yardımcı olmaktadır.

Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer skuamöz hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • HARAB

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HARA-B (Cytion katalog numarası 300465)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Yüksek düzeyde paratiroid hormonu ile ilişkili peptid (PTHrP) üretir.

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
57 yıl
Etnik köken
Japonca