Ga naar de inhoud
HARA-B
Weefsel
Long
Ziekte
Longsquameus celcarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
HARAB

Documenten

HARA-B

Cell line · Productnummer 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HARA-B cellijn is afgeleid van humaan plaveiselcelcarcinoom van de long, dat specifiek is vastgesteld op basis van uitgezaaid botweefsel in een muismodel. Deze cellijn is een secundaire ontwikkeling van de oorspronkelijke HARA cellijn en wordt gekenmerkt door de hoge expressie van parathyroïd hormoon-gerelateerd proteïne (PTHrP), dat een belangrijke rol speelt in de uitgebreide botmetastase die in deze cellen wordt waargenomen. De HARA-B lijn heeft een belangrijke rol gespeeld bij het bestuderen van de mechanismen van botmetastase die geassocieerd worden met longkanker.

Wetenschappelijke studies waarbij HARA-B betrokken is, richten zich vaak op het nut ervan bij het modelleren van hypercalciëmie, een veelvoorkomend paraneoplastisch syndroom dat geassocieerd wordt met bepaalde kankers, waaronder longkanker. De hypercalciëmie in dit model wordt opgewekt door hypodermische transplantatie van de cellen, waardoor een waardevol hulpmiddel ontstaat voor het begrijpen van de interacties tussen kankercellen en botcellen, evenals de routes die leiden tot botafbraak en het vrijkomen van calcium. Deze cellijn helpt onderzoekers bij het onderzoeken van mogelijke therapeutische strategieën om botmetastase en bijbehorende complicaties bij longkankerpatiënten te verminderen.

Weefsel
Long
Ziekte
Longsquameus celcarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • HARAB

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
HARA-B (Cytion catalogusnummer 300465)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Produceert een hoog niveau van aan bijschildklierhormoon gerelateerd peptide (PTHrP).

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
57 jaar
Etnische afkomst
Japans