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HARA-B
Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
HARAB

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HARA-B

Cell line · Artikelnummer 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HARA-B-Zelllinie stammt von humanen Plattenepithelkarzinomen der Lunge, die speziell aus metastatischem Knochengewebe in einem Mausmodell gewonnen wurden. Diese Zelllinie ist eine sekundäre Entwicklung aus der ursprünglichen HARA-Zelllinie und zeichnet sich durch ihre hohe Expression von Parathormon-verwandtem Protein (PTHrP) aus, das eine wichtige Rolle bei der in diesen Zellen beobachteten umfangreichen Knochenmetastasierung spielt. Die HARA-B-Linie hat bei der Untersuchung der Mechanismen der Knochenmetastasierung bei Lungenkrebs eine wichtige Rolle gespielt.

Wissenschaftliche Studien, an denen HARA-B beteiligt ist, konzentrieren sich häufig auf seine Nützlichkeit bei der Modellierung von Hyperkalzämie, einem häufigen paraneoplastischen Syndrom im Zusammenhang mit bestimmten Krebsarten, einschließlich Lungenkrebs. Die Hyperkalzämie in diesem Modell wird durch eine subkutane Transplantation der Zellen ausgelöst, was ein wertvolles Instrument zum Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Krebszellen und Knochenzellen sowie der Wege darstellt, die zum Knochenabbau und zur Kalziumfreisetzung führen. Diese Zelllinie hilft den Forschern bei der Untersuchung potenzieller therapeutischer Strategien zur Eindämmung der Knochenmetastasierung und der damit verbundenen Komplikationen bei Lungenkrebspatienten.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • HARAB

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger

03Bezeichner

Quellenangabe
HARA-B (Cytion-Katalognummer 300465)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Produziert hohe Mengen an Parathormon-verwandtem Peptid (PTHrP).

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
57 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch