Przejdź do treści
HARA-B
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
HARAB

Dokumenty

HARA-B

Cell line · Numer produktu 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HARA-B wywodzi się z ludzkiego raka płaskonabłonkowego płuc, specjalnie utworzonego z przerzutowej tkanki kostnej w modelu mysim. Ta linia komórkowa jest wtórnym rozwinięciem oryginalnej linii komórkowej HARA i charakteryzuje się wysoką ekspresją białka związanego z hormonem przytarczyc (PTHrP), które odgrywa istotną rolę w rozległych przerzutach do kości obserwowanych w tych komórkach. Linia HARA-B odegrała kluczową rolę w badaniu mechanizmów przerzutów do kości związanych z rakiem płuc.

Badania naukowe z udziałem HARA-B często koncentrują się na jej użyteczności w modelowaniu hiperkalcemii, powszechnego zespołu paranowotworowego związanego z niektórymi nowotworami, w tym rakiem płuc. Hiperkalcemia w tym modelu jest indukowana przez podskórny przeszczep komórek, zapewniając cenne narzędzie do zrozumienia interakcji między komórkami nowotworowymi a komórkami kości, a także szlaków prowadzących do degradacji kości i uwalniania wapnia. Ta linia komórkowa pomaga naukowcom badać potencjalne strategie terapeutyczne w celu złagodzenia przerzutów do kości i związanych z nimi powikłań u pacjentów z rakiem płuc.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • HARAB

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik

03Identyfikatory

Źródło
HARA-B (numer katalogowy Cytion 300465)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Wytwarza wysoki poziom peptydu związanego z hormonem przytarczyc (PTHrP).

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
57 lat
Pochodzenie etniczne
Japoński