Siirry sisältöön
HARA-B
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
HARAB

Asiakirjat

HARA-B

Cell line · Tuotenumero 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HARA-B-solulinja on peräisin ihmisen keuhkojen levyepiteelisolusyövästä, joka on erityisesti luotu hiirimallissa metastaattisesta luukudoksesta. Tämä solulinja on alkuperäisen HARA-solulinjan toissijainen kehitys, ja sille on ominaista, että se ilmentää runsaasti lisäkilpirauhashormoniin liittyvää proteiinia (PTHrP), jolla on merkittävä rooli näissä soluissa havaitussa laajamittaisessa luustometastaasissa. HARA-B-solulinja on ollut tärkeä keuhkosyöpään liittyvän luustometastaasin mekanismien tutkimisessa.

Tieteellisissä tutkimuksissa, joissa HARA-B:tä käytetään, keskitytään usein sen hyödyllisyyteen hyperkalsemian mallintamisessa, joka on yleinen paraneoplastinen oireyhtymä, joka liittyy tiettyihin syöpiin, myös keuhkosyöpään. Tässä mallissa hyperkalsemia aiheutuu solujen hypodermisella siirrolla, mikä tarjoaa arvokkaan välineen ymmärtää syöpäsolujen ja luusolujen välisiä vuorovaikutuksia sekä luun hajoamiseen ja kalsiumin vapautumiseen johtavia reittejä. Tämä solulinja auttaa tutkijoita tutkimaan mahdollisia terapeuttisia strategioita, joilla voidaan lieventää luustometastaaseja ja niihin liittyviä komplikaatioita keuhkosyöpäpotilailla.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • HARAB

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt

03Tunnisteet

Lähdeviite
HARA-B (Cytionin luettelonumero 300465)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Tuottaa runsaasti lisäkilpirauhashormoniin liittyvää peptidiä (PTHrP).

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
57 vuotta
Etnisyys
Japanilainen