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HARA-B
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma polmonare a cellule squamose
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
HARAB

Documenti

HARA-B

Cell line · Codice prodotto 300465

The HARA-B cell line is derived from human squamous cell carcinoma of the lung, specifically established from metastatic bone tissue in a mouse model. Thi...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HARA-B è derivata da un carcinoma polmonare a cellule squamose umano, specificamente creato da tessuto osseo metastatico in un modello murino. Questa linea cellulare è uno sviluppo secondario della linea cellulare HARA originale ed è caratterizzata da un'elevata espressione della proteina legata all'ormone paratiroideo (PTHrP), che svolge un ruolo significativo nelle estese metastasi ossee osservate in queste cellule. La linea HARA-B è stata fondamentale per lo studio dei meccanismi delle metastasi ossee associate al cancro del polmone.

Gli studi scientifici che coinvolgono HARA-B si concentrano spesso sulla sua utilità nel modellare l'ipercalcemia, una comune sindrome paraneoplastica associata ad alcuni tipi di cancro, tra cui il cancro del polmone. L'ipercalcemia in questo modello è indotta dal trapianto ipodermico delle cellule, fornendo uno strumento prezioso per comprendere le interazioni tra le cellule tumorali e le cellule ossee, nonché le vie che portano alla degradazione dell'osso e al rilascio di calcio. Questa linea cellulare aiuta i ricercatori a studiare potenziali strategie terapeutiche per mitigare le metastasi ossee e le complicazioni associate nei pazienti affetti da cancro del polmone.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma polmonare a cellule squamose
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • HARAB

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente

03Identificatori

Riferimento bibliografico
HARA-B (numero di catalogo Cytion 300465)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2915

04Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Produce un alto livello di peptide legato all'ormone paratiroideo (PTHrP).

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
57 anni
Etnia
Giapponese