.jpg)
- Doku
- Kolon
- Hastalık
- Adenokarsinom, Derece IV, Dukes tipi B.
- Eş anlamlılar
- SW480, SW 480, SW480E
Belgeler
SW-480
Cell line · Ürün numarası 300302
The SW480 cell line originated from a surgical specimen of a primary tumor of a moderately differentiated colon adenocarcinoma.
Kişiselleştirme / Öneriler
- SW-480Cell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
SW480 hücre hattı, orta derecede farklılaşmış bir kolon adenokarsinomunun primer tümörünün cerrahi örneğinden kaynaklanmıştır.
- Doku
- Kolon
- Hastalık
- Adenokarsinom, Derece IV, Dukes tipi B.
- Eş anlamlılar
- SW480
- SW 480
- SW480E
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitel benzeri
- Tümör oluşturucu
- Evet, çıplak farelerde
- İki katına çıkma süresi
- 20 ila 25 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- SW-480 (Cytion katalog numarası 300302)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0546
05İfade ve duyarlılık
- Eksprese edilen reseptörler
- Epidermal büyüme faktörü (EGF), keratin (immünoperoksidaz boyama). Tümör invazivliği ile ilişkili bir metalloproteinaz olan matrilysin eksprese edilmez.
- Protein ekspresyonu
- Hücreler yüksek seviyelerde p53 proteini ifade eder.
- Antijen ekspresyonu
- HLA A2, B8, B17, kan grubu A, Rh+. Çizgi CSAp (CSAp-) ve kolon antijeni 3 için negatiftir
- İzoenzimler
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
- Mutasyon profili
- SW-480 hücreleri kodon 12'de homozigot Kras mutasyonu taşır: GGT(Wt Gly)>GTT(Val). P53 geninin 273 kodonunda Arg->His ikamesi ile sonuçlanan bir G->A mutasyonu ve 309 kodonunda Pro->Ser ikamesi ile sonuçlanan bir C->T mutasyonu vardır.
- Virüsler
- Ters transkriptaz negatif
- Virüse karşı duyarlılık
- İnsan immün yetmezlik virüsü (HIV, LAV)
- Ürünler
- Karsinoembriyonik antijen (CEA) 0,7 ng/106 hücre/10 gün, keratin, TGF-β. Hücrelerin GM-CSF ürettiği bildirilmiştir.
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820600a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Ekim yoğunluğu
- 1 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 1 ila 2 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 50 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet
