الانتقال إلى المحتوى
SW-480
الأنسجة
القولون
المرض
سرطان غدي، من الدرجة الرابعة، نوع دوكس ب.
المرادفات
SW480, SW 480, SW480E

المستندات

SW-480

Cell line · رقم المنتج 300302

The SW480 cell line originated from a surgical specimen of a primary tumor of a moderately differentiated colon adenocarcinoma.

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

نشأ الخط الخلوي SW480 من عينة جراحية لورم أولي لسرطان القولون الغدي المتمايز بشكل معتدل.

الأنسجة
القولون
المرض
سرطان غدي، من الدرجة الرابعة، نوع دوكس ب.
المرادفات
  • SW480
  • SW 480
  • SW480E

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية
زمن المضاعفة
20 إلى 25 ساعة

04المعرّفات

المرجع
SW-480 (كتالوج سيتيون رقم 300302)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0546

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
عامل نمو البشرة (EGF)، الكيراتين (تلوين مناعي). لا يتم التعبير عن الماتريليسين (Matrilysin)، وهو بروتين معدني مرتبط بتوغل الورم.
التعبير البروتيني
تعبر الخلايا عن مستويات مرتفعة من بروتين p53.
التعبير عن المستضد
HLA A2، B8، B8، B17، وفصيلة الدم A، وريزوس +. الخط سلبي بالنسبة إلى CSAp (CSAp-) ومستضد القولون 3
الإيزوزيمات
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
الأنماط الطفريّة
تحمل خلايا SW-480 طفرة متماثلة الزيجوت في الكودون 12: GGT(Wt Gly) >GTT(Val). وتوجد طفرة G->A في الكودون 273 من الجين p53 تؤدي إلى استبدال Arg->His وطفرة C->T في الكودون 309 تؤدي إلى استبدال Pro->Ser.
الفيروسات
سالب النسخ العكسي
قابلية الإصابة بالفيروس
فيروس نقص المناعة البشري (HIV، LAV)
المنتجات
المستضد الكارسينومبريوني (CEA) 0.7 نانوغرام/106 خلية/10 أيام، الكيراتين، TGF-β. وقد تم الإبلاغ عن إنتاج الخلايا لعامل التجلط GM-CSF.

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
هامز إف 12، ث: 1.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.1 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة سيتيون 820600a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
1 إلى 2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
50 عاماً
الأصل العرقي
قوقازي