Gå direkte til indholdet
SW-480
Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom, grad IV, Dukes' type B.
Synonymer
SW480, SW 480, SW480E

Dokumenter

SW-480

Cell line · Varenummer 300302

The SW480 cell line originated from a surgical specimen of a primary tumor of a moderately differentiated colon adenocarcinoma.

€430.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

SW480-cellelinjen stammer fra en kirurgisk prøve af en primær tumor af et moderat differentieret adenokarcinom i tyktarmen.

Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom, grad IV, Dukes' type B.
Synonymer
  • SW480
  • SW 480
  • SW480E

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus
Fordoblingstid
20 til 25 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SW-480 (Cytion katalognummer 300302)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0546

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Epidermal vækstfaktor (EGF), keratin (immunoperoxidase-farvning). Matrilysin, en metalloproteinase, der er forbundet med tumorinvasivitet, udtrykkes ikke.
Proteinekspression
Cellerne udtrykker forhøjede niveauer af p53-protein.
Antigenudtryk
HLA A2, B8, B17, blodtype A, Rh+. Linjen er negativ for CSAp (CSAp-) og colon antigen 3
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutationsprofil
SW-480-celler bærer en homozygot Kras-mutation i codon 12: GGT(Wt Gly) >GTT(Val). Der er en G->A-mutation i codon 273 i p53-genet, som resulterer i en Arg->His-substitution, og en C->T-mutation i codon 309, som resulterer i en Pro->Ser-substitution.
Vira
Revers transkriptase negativ
Virusfølsomhed
Human immundefekt-virus (HIV, LAV)
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 0,7 ng/106 celler/10 dage, keratin, TGF-β. Det er blevet rapporteret, at cellerne producerer GM-CSF.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
1 til 2 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
50 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk