Pereiti prie turinio
SW-480
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma, IV laipsnio, Dukes'o B tipo.
Sinonimai
SW480, SW 480, SW480E

Dokumentai

SW-480

Cell line · Prekės numeris 300302

The SW480 cell line originated from a surgical specimen of a primary tumor of a moderately differentiated colon adenocarcinoma.

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Ląstelių linija SW480 buvo gauta iš chirurginiu būdu paimto vidutiniškai diferencijuotos storosios žarnos adenokarcinomos pirminio naviko pavyzdžio.

Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma, IV laipsnio, Dukes'o B tipo.
Sinonimai
  • SW480
  • SW 480
  • SW480E

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
20-25 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
SW-480 (Cytion katalogo numeris 300302)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0546

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
Epidermio augimo faktorius (EGF), keratinas (imunoperoksidazės dažymas). Matrilizinas, metaloproteinazė, siejama su naviko invazyvumu, nėra išreikšta.
Baltojų baltymų ekspresija
Ląstelėse padidėja p53 baltymo kiekis.
Antigeno ekspresija
HLA A2, B8, B17, A kraujo grupė, Rh+. Neigiamas CSAp (CSAp-) ir storosios žarnos antigeno 3 rodiklis
Izofermentai
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutacijų profilis
SW-480 ląstelės turi homozigotinę Kras mutaciją 12 kodone: GGT(Wt Gly) >GTT(Val). P53 geno 273 kodone yra G->A mutacija, dėl kurios atsiranda Arg->His, o 309 kodone yra C->T mutacija, dėl kurios atsiranda Pro->Ser.
Virusai
Atvirkštinės transkriptazės neigiamas
Jautrumas virusams
Žmogaus imunodeficito virusas (ŽIV, LAV)
Produktai
Karcinoembrioninis antigenas (CEA) 0,7 ng/106 ląstelių/10 dienų, keratinas, TGF-β. Pranešama, kad ląstelės gamina GM-CSF.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
50 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių