Přejít na obsah
SW-480
Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom, stupeň IV, Dukesův typ B.
Synonyma
SW480, SW 480, SW480E

Dokumenty

SW-480

Cell line · Číslo výrobku 300302

The SW480 cell line originated from a surgical specimen of a primary tumor of a moderately differentiated colon adenocarcinoma.

€430.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SW480 pochází z chirurgického vzorku primárního nádoru středně diferencovaného adenokarcinomu tlustého střeva.

Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom, stupeň IV, Dukesův typ B.
Synonyma
  • SW480
  • SW 480
  • SW480E

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Doba zdvojnásobení
20 až 25 hodin

04Identifikátory

Citace
SW-480 (katalogové číslo Cytion 300302)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0546

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Epidermální růstový faktor (EGF), keratin (barvení imunoperoxidázou). Matrilysin, metaloproteináza spojená s invazivitou nádoru, není exprimován.
Exprese proteinů
Buňky exprimují zvýšenou hladinu proteinu p53.
Exprese antigenu
HLA A2, B8, B17, krevní skupina A, Rh+. Linie je negativní na CSAp (CSAp-) a antigen tlustého střeva 3
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutační profil
Buňky SW-480 nesou homozygotní mutaci Krasu v kodonu 12: GGT(Wt Gly) >GTT(Val). V kodonu 273 genu p53 je mutace G->A, která vede k záměně Arg->His, a mutace C->T v kodonu 309, která vede k záměně Pro->Ser.
Viry
Reverzní transkriptáza negativní
Náchylnost k virům
Virus lidské imunodeficience (HIV, LAV)
Produkty
Karcinoembryonální antigen (CEA) 0,7 ng/106 buněk/10 dní, keratin, TGF-β. Bylo zjištěno, že buňky produkují GM-CSF.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
50 let
Etnická příslušnost
Kavkazský