Клітини U87MG — дослідження гліобластоми з використанням клітин U87MG та їхній вплив на дослідження раку мозку

U-87 MG, лінія первинних клітин гліобластоми людини, широко використовується в біологічних дослідженнях. Зокрема, ці клітини застосовуються в галузі нейронауки та імуноонкології.

Загальні характеристики та походження клітинної лінії U-87 MG

У цьому розділі розглядаються походження та загальні характеристики клітинної лінії U87. Ви дізнаєтеся: що таке клітини U-87 MG? Звідки походять клітини U87? Що означає абревіатура U-87 MG? Який розмір клітин U87? Яка морфологія клітинної лінії U87?

• Клітинна лінія U87 — це клітинна лінія гліобластоми, астроцитоми. Вона була створена в 1966 році в Уппсальському університеті. Клітини було отримано від 44-річного чоловіка європейської раси, який страждав на гліобластому. Ця клітинна лінія офіційно називається U 87 MG, що розшифровується як «Uppsala 87 Malignant Glioma» (злоякісна гліома Уппсали 87).
• Клітини U 87 MG мають морфологію, схожу на епітеліальні клітини.
• Діаметр клітин U 87 MG становить від 12 до 14 мкм.
• Ця лінія клітин людської гліобластоми є гіподиплоїдною і має модальне число хромосом 44 приблизно у 48 % клітинної популяції. Однак у 5,9 % клітинної популяції зустрічаються й вищі плоїдії.

Медична 3D-анімація, що пояснює процес утворення пухлин з астроцитів.

Інформація щодо культивування клітин U-87 MG

Перед початком роботи з клітинами U 87 MG слід ознайомитися з наступними ключовими моментами культивування цих клітин гліобластоми. Зокрема, слід знати: Який час подвоєння популяції клітин U 87 MG? Яке середовище використовується для культивування клітин U87? Яка щільність висівання клітинної лінії U-87 MG?

Ключові моменти культивування клітин U-87 MG

Час подвоєння популяції:

Час подвоєння популяції клітин U 87 MG становить від 18 до 38 годин.

Адгезивні або у суспензії:

U 87 MG — це адгезивна клітинна лінія. Клітини мають видовжену форму і ростуть у вигляді моношарів.

Щільність висівання:

Клітинну лінію гліобластоми U 87 MG рекомендується висівати з щільністю 1 × 10^⁴ клітин/см². Адгезивні клітини U87 промивають 1×PBS та інкубують з розчином Accutase. Після цього дисоційовані клітини центрифугують та відбирають. Клітини обережно ресуспендують і додають у нові колби, що містять середовище для росту.

Середовище для культивування:

Клітинну лінію U 87 MG культивують у середовищі EMEM (мінімальне есенційне середовище Ігл) з додаванням 1,0 г/л L-глюкози, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 мМ пірувату натрію та 10 % розчину FBS. Середовище слід оновлювати кожні 2–3 дні.

Умови культивування:

Для оптимального росту клітин U-87 MG необхідний зволожений інкубатор із подачею 5 % CO₂ та температурою 37 °C.

Зберігання:

Клітини U87 зберігають або у паровій фазі рідкого азоту, або при температурі нижче -150 °C для збереження максимальної життєздатності клітин гліобластоми.

Процес заморожування та середовище:

Для заморожування клітин U 87 MG підходять середовища CM-1 або CM-ACF. Рекомендується повільний процес заморожування, оскільки це запобігає шоку клітин та захищає їх життєздатність.

Процес розморожування:

Заморожені флакони з клітинною лінією U-87 MG розморожують у водяній бані при температурі 37 °C. До клітин додають живильне середовище, ресуспендують їх і переносять для культивування в нові колби. Крім того, клітини U87 можна відцентрифугувати для видалення середовища для заморожування, а потім культивувати.

Рівень біобезпеки:

Для роботи з культурами клітин U 87 MG необхідний рівень біобезпеки 1.

Клітини U-87 MG під мікроскопом із 10-кратним та 20-кратним збільшенням.

Переваги та недоліки клітин U-87 MG

Коли ми думаємо про клітинну лінію, перше, що спадає на думку, це: які переваги використання клітин U-87 MG? Які недоліки клітин U-87 MG?

Переваги

Клітинні лінії U-87 MG широко використовуються в наукових дослідженнях. Ось кілька переваг, пов’язаних із цією клітинною лінією:

Переваги

• Простота культивування: клітини U-87 MG легко утримувати в культурі. Вони не вимагають вибагливих або складних умов культивування.
• Однорідність: U-87 MG — це однорідна клітинна лінія. Більшість клітин у популяції мають однаковий генетичний склад і, отже, подібні характеристики. Ці клітини використовуються для вивчення клітинних процесів, скринінгу лікарських засобів та тестування.
• Добре охарактеризована: Ця клітинна лінія гліобластоми має чітко визначені характеристики росту, морфології та експресії генів, що робить її цінним інструментом для досліджень.

Недоліки

• Обмежена сфера застосування: U-87 MG — це клітинна лінія гліобластоми, тому її застосування обмежується переважно вивченням гліобластом та відповідних молекулярних механізмів. Вона може не підходити для дослідження інших видів раку.

Наукові застосування клітин U-87 MG

Клітинна лінія гліобластоми U87MG широко використовується в дослідженнях раку, зокрема в дослідженнях гліобластоми. Деякі напрямки застосування клітин U 87 MG у наукових дослідженнях:

• Дослідження біології раку: клітинна лінія U87 використовується для вивчення росту та розвитку раку, відповідних молекулярних механізмів, сигнальних шляхів та мікросередовища пухлини. У дослідженні, опублікованому в 2020 році, використовували in vitro-модель гліобластоми — клітинну лінію U-87 MG — для вивчення гена BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) як терапевтичної мішені. Результати показали, що ген BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин гліобластоми шляхом пригнічення експресії генів цикліну B1, металопротеїнази-9 та фосфо-AKT [1]. В іншому дослідженні, проведеному у 2019 році, також використовували клітинну лінію U87 і встановили, що зниження експресії транскрипційного фактора LITAF (ліпополісахарид-індукований фактор некрозу пухлин-альфа) може підвищити радіочутливість клітин гліоми через активацію шляху FOXO-1. LITAF також відомий як ген 7, індукований p53 (PIG7) [2].
• Відкриття та розробка лікарських засобів: клітини U-87 MG можна використовувати для скринінгу та тестування лікарських засобів, що дозволяє дослідникам виявляти нові потенційні протиракові препарати та оцінювати їхню ефективність і токсичність. У ході дослідження використовували клітинну лінію гліобластоми U 87 MG для оцінки протиракової та антиоксидантної активності екстракту Inula helenium (L.) [3]. Аналогічно, в іншій публікації згадувалося використання клітинної лінії U87 для тестування цитотоксичного та апоптотичного ефекту рослинних екстрактів [4]. Крім того, у дослідженні, опублікованому в 2018 році, вивчався цитотоксичний ефект сесквітерпенових алкалоїдів, екстрагованих із рослин роду Nuphar, на чутливі та резистентні до ліків клітинні лінії U-87 MG [5].

Замовте клітинну лінію гліоми U87 MG вже сьогодні

Клітинна лінія U-87 MG: Наукові публікації

Ось кілька відомих наукових публікацій, присвячених клітинній лінії U-87 MG.

Гіпоксія посилює міграцію та інвазію клітин людської гліобластоми U87 через сигнальний шлях PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α

У цій статті, опублікованій у журналі «Neuroreport» у 2018 році, висунуто гіпотезу, що гіпоксія може посилювати міграцію та інвазію клітин гліобластоми людини шляхом регулювання сигнального шляху PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.

Еріодіктиол пригнічує проліферацію та метастазування клітин гліоми та індукує їх апоптоз через сигнальний шлях PI3K/Akt/NF-κB

Це дослідження опубліковано у журналі «Frontiers in Pharmacology» у 2020 році. Результати дослідження свідчать, що флавоноїд еріодіктиол чинить протиракову дію на клітинну лінію U87 та пригнічує проліферацію клітин і метастазування. Ця сполука проявляє свої протипухлинні властивості шляхом модуляції сигнального шляху PI3K/Akt/NF-κB.

Таблетки «Сіхуан» індукують апоптоз клітин людської гліобластоми U-87 MG шляхом впливу на шлях Akt/mTOR/FOXO1, опосередкований активними формами кисню (ROS)

Це дослідження, опубліковане в журналі «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2018), свідчить про те, що китайська фітопрепаратна формула під назвою «пігулка Сіхуан» може індукувати апоптоз у клітинах U87 шляхом впливу на каскад Akt/mTOR/FOXO1, активований АФК.

LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1

Ця наукова стаття була опублікована в журналі «Cellular and Molecular Neurobiology» у 2019 році. У дослідженні висунуто гіпотезу, що транскрипційний фактор LITAF пригнічує експресію FOXO-1 та підвищує радіочутливість клітин гліоми шляхом регулювання сигнального шляху FOXO-1.

Отримання наночастинок PLGA, наповнених куркуміном, та дослідження їх цитотоксичного впливу на клітини гліобластоми людини U87MG

Ця стаття була опублікована в журналі «Biointerface Research in Applied Chemistry» (2019). Дослідники використовували клітини U87MG для вивчення цитотоксичного ефекту наночастинок PLGA, наповнених куркуміном.

Ресурси щодо клітин U-87 MG: протоколи, відео та інше

Клітинна лінія гліобластоми U87MG використовується в багатьох лабораторіях, що займаються дослідженнями раку. Ось кілька ресурсів, присвячених цій клітинній лінії:

• Трансфекція клітинної лінії U87: У цьому документі описано протокол трансфекції клітин U87MG.
• Трансфекція клітинної лінії U 87 MG: це відео є покроковим посібником, що пояснює протокол трансфекції клітин U87.

Ресурс із протоколом культивування клітин U87 наведено нижче:

• Клітини U87 MG: Це посилання містить основну інформацію про клітинну лінію U87 MG. Воно включає короткі протоколи поділу, заморожування та розморожування клітин.

Погляди на дослідження гліоми U87 MG: Поширені запитання

Література

1. Gwon, D.H. та ін., BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин U87MG шляхом зниження експресії цикліну B1, фосфо-AKT та металопротеїнази-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
2. Хуан, Ц. та ін., LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): с. 871–882.
3. Koc, K. та ін., «Антиоксидантна та протиракова активність екстракту Inula helenium (L.) у клітинній лінії гліобластоми людини U-87 MG». J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): с. 658–661.
4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh та A. Ghasempour, «Цитотоксичність та індукція апоптозу в клітинах раку молочної залози, раку шкіри та гліобластоми під дією рослинних екстрактів». Mol Biol Rep, 2019. 46(5): с. 5131–5142.
5. Фукая, М. та ін., Цитотоксичність сесквітерпенових алкалоїдів рослин роду Nuphar щодо чутливих та резистентних до ліків клітинних ліній. Food Funct, 2018. 9(12): с. 6279–6286.