U87MG-celler – Forskning om glioblastom med hjälp av U87MG och dess betydelse för studier av hjärncancer

U-87 MG, den humana primära glioblastomcellinjen, används i stor utsträckning inom biologisk forskning. Dessa celler används särskilt inom neurovetenskap och immunonkologi.

Allmänna egenskaper och ursprung för cellinjen U-87 MG

I detta avsnitt går vi igenom ursprunget och de allmänna egenskaperna hos cellinjen U87. Du kommer att lära dig: Vad är U-87 MG-celler? Varifrån kommer U87-cellen? Vad står U-87 MG för? Hur stora är U87-cellerna? Hur ser cellinjen U87 ut morfologiskt?

• U87-cellinjen är en glioblastom- och astrocytomcellinje. Den etablerades 1966 vid Uppsala universitet. Cellerna erhölls från en 44-årig kaukasisk man som led av glioblastom. Denna cellinje kallas formellt U 87 MG, vilket står för Uppsala 87 Malignant Glioma.
• U 87 MG-cellerna uppvisar en epitelcellsliknande morfologi.
• Storleken på U 87 MG-cellerna varierar mellan 12 och 14 µm i diameter.
• Denna humana glioblastomcellinje är hypodiploid och har ett modalt kromosomantal på 44 hos cirka 48 % av cellpopulationen. Högre ploidier förekommer dock också hos 5,9 % av cellpopulationen.

Medicinsk 3D-animation som förklarar hur tumörer uppstår från astrocyter.

Information om odling av U-87 MG-celler

Innan du arbetar med U 87 MG-celler bör du sätta dig in i följande viktiga punkter för odling av dessa glioblastomceller. Framför allt bör du veta: Vad är populationens fördubblingstid för U 87 MG-celler? Vilka odlingsmedier används för odling av U87-celler? Vad är utsädesdensiteten för cellinjen U-87 MG?

Viktiga punkter för odling av U-87 MG-celler

Populationsfördubblingstid:

U 87 MG-celler har en fördubblingstid på mellan 18 och 38 timmar.

Adhärenta eller i suspension:

U 87 MG är en vidhäftande cellinje. Cellerna har en avlång form och växer som monoskikt.

Utsåddstäthet:

För glioblastomcellinjen U 87 MG rekommenderas en utsädesdensitet på 1 × 10^⁴ cell^er/cm². Adhärenta U87-celler tvättas med 1× PBS och inkuberas med Accutase-lösning. Därefter centrifugeras de dissocierade cellerna och återvinns. Cellerna resuspenderas försiktigt och tillsätts i nya kolvar som innehåller odlingsmedium.

Odlingsmedium:

Cellinjen U 87 MG odlas i EMEM (Eagle's minimal essential medium) berikat med 1,0 g/L L-glukos, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat och 10 % FBS-lösning. Mediet bör bytas ut var 2:a till 3:e dag.

Odlingsförhållanden:

U-87 MG-celler kräver en fuktad inkubator med 5 % CO₂-tillförsel och en temperatur på 37 °C för optimal tillväxt.

Förvaring:

U87-cellerna förvaras antingen i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150 °C för att upprätthålla maximal livskraft hos glioblastomcellerna.

Frysningsprocess och medium:

Frysmedierna CM-1 eller CM-ACF är lämpliga för frysning av U87 MG-celler. En långsam frysningsprocess rekommenderas eftersom den förhindrar att cellerna utsätts för chock och skyddar cellernas livskraft.

Upptining:

Frysta ampuller med U-87 MG-cellinjen tinas i ett vattenbad vid 37 °C. Cellerna tillsätts till odlingsmedium, resuspenderas och överförs till nya kolvar för odling. Alternativt kan U87-cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediet och därefter odlas.

Biosäkerhetsnivå:

Biosäkerhetsnivå 1 krävs för hantering av U 87 MG-cellkulturer.

U-87 MG-celler under mikroskop med 10x och 20x förstoring.

Fördelar och nackdelar med U-87 MG-celler

När vi tänker på en cellinje är det första som slår oss: Vilka är fördelarna med att använda U-87 MG-celler? Vilka är nackdelarna med U-87-celler?

Fördelar

U-87 MG-cellinjer används i stor utsträckning inom forskningen. Några fördelar med denna cellinje är:

Fördelar

• Lätta att odla: U-87 MG-celler är lätta att hålla i odling. De ställer inga krångliga eller komplicerade krav på cellodling.
• Homogenitet: U-87 MG är en homogen cellinje. De flesta cellerna i en population har samma genetiska sammansättning och delar därför liknande egenskaper. Dessa celler används för att studera cellprocesser, läkemedelsscreening och testning.
• Välkarakteriserad: Denna glioblastomcellinje är välkarakteriserad vad gäller tillväxtegenskaper, morfologi och genuttryck, vilket gör den till ett värdefullt forskningsverktyg.

Nackdelar

• Begränsad tillämpbarhet: U-87 MG är en glioblastomcellinje, vilket innebär att dess tillämpningar i första hand är begränsade till studier av glioblastom och underliggande molekylära mekanismer. Den är kanske inte lämplig för att undersöka andra cancerformer.

Forskningsapplikationer med U-87 MG-celler

Glioblastomcellinjen U87MG används i stor utsträckning i cancerstudier, särskilt inom glioblastomforskning. Några av forskningsanvändningarna av U 87 MG-celler är:

• Forskning inom cancerbiologi: U87-cellinjen används för att studera cancertillväxt och -utveckling, underliggande molekylära mekanismer, signalvägar och tumörens mikromiljö. I en studie som publicerades 2020 användes en in vitro-modell för glioblastom, cellinjen U-87 MG, för att undersöka BMAL1-genen (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som ett terapeutiskt mål. Resultaten visade att BMAL1-genen hämmar glioblastomcellernas proliferation, migration och invasion genom att undertrycka genuttrycket av cyklin B1, metalloproteinas-9 och fosfo-AKT [1]. I en annan studie som genomfördes 2019 användes cellinjen U87 för att undersöka hur en nedreglerad expression av transkriptionsfaktorn LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) kan öka gliomcellernas strålkänslighet genom uppreglering av FOXO-1-signalvägen. LITAF är även känt som p53-inducerat gen 7 (PIG7) [2].
• Läkemedelsupptäckt och -utveckling: U-87 MG-celler kan användas för läkemedelsscreening och testning, vilket gör det möjligt för forskare att identifiera nya potentiella läkemedel mot cancer och bedöma deras effekt och toxicitet. I en studie användes U87MG-glioblastomcellinjen för att utvärdera den cancerhämmande och antioxidativa potentialen hos Inula helenium (L.)-extrakt [3]. På samma sätt nämndes i en annan publikation användningen av U87-cellinjen för att testa den cytotoxiska och apoptotiska effekten av växtextrakt [4]. Dessutom studerade en studie publicerad 2018 den cytotoxiska effekten av sesquiterpenalkaloider extraherade från Nuphar-växter på känsliga och läkemedelsresistenta U-87-MG-cellinjer [5].

Beställ din U87 MG-gliomcellinje redan idag

U-87 MG-cellinjen: Forskningspublikationer

Här följer några framstående forskningspublikationer som behandlar cellinjen U 87 MG.

Hypoxi förstärker migrationen och invasionen av humana glioblastomceller av typen U87 via PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvägen

Denna artikel, publicerad i Neuroreport 2018, föreslog att hypoxi skulle kunna öka migrationen och invasionen hos humana glioblastomceller genom att reglera PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvägen.

Eriodictyol hämmar proliferation och metastasering samt inducerar apoptos hos gliomceller via PI3K/Akt/NF-κB-signalvägen

Denna studie publicerades i tidskriften Frontiers in Pharmacology 2020. Forskningsresultaten visar att flavonoiden Eriodictyol har anticancereffekter på cellinjen U87 och hämmar cellproliferation och metastasering. Föreningen utövar sina antitumöregenskaper genom att modulera PI3K/Akt/NF-κB-signalvägen.

Xihuang-piller inducerar apoptos hos humana glioblastomceller av typen U-87 MG genom att rikta in sig på den ROS-medierade Akt/mTOR/FOXO1-signalvägen

Denna studie, publicerad i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), tyder på att en kinesisk örtblandning kallad Xihuang-piller kan framkalla apoptos i U87-celler genom att rikta in sig på den ROS-aktiverade Akt/mTOR/FOXO1-signalkaskaden.

LITAF ökar strålkänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-signalvägen

Denna forskningsartikel publicerades i tidskriften *Cellular and Molecular Neurobiology* år 2019. Studien föreslog att en transkriptionsfaktor, LITAF, nedreglerar och ökar strålkänsligheten hos gliomceller genom att reglera FOXO-1-signalvägen.

Framställning av kurkuminladdade PLGA-nanopartiklar och undersökning av deras cytotoxiska effekter på humana glioblastomceller av typen U87MG

Denna artikel publicerades i tidskriften *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). Forskarna använde U87MG-celler för att undersöka den cytotoxiska effekten av kurkuminladdade PLGA-nanopartiklar.

Resurser för U-87 MG-celler: protokoll, videor och mer

Glioblastomcellinjen U87MG används i många laboratorier för cancerforskning. Några resurser som behandlar denna cellinje är:

• Transfektion av U87-cellinjen: Detta dokument beskriver ett transfektionsprotokoll för U87MG-celler.
• Transfektion av cellinjen U 87 MG: Denna video är en handledning som steg för steg förklarar transfektionsprotokollet för U87-celler.

Resursen för cellodlingsprotokollet för U87-celler finns listad nedan:

• U87MG-celler: Denna länk innehåller grundläggande information om cellinjen U87MG. Den innehåller kortfattade protokoll för celldelning, frysning och upptining av celler.

Insikter i U87 MG Glioma-forskning: Ofta ställda frågor

Referenser

1. Gwon, D.H., et al., BMAL1 hämmar proliferation, migration och invasion av U87MG-celler genom att nedreglera cyklin B1, fosfo-AKT och metalloproteinas-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
2. Huang, C., et al., LITAF ökar strålkänsligheten hos humana gliomceller via FoxO1-signalvägen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871–882.
3. Koc, K., et al., Antioxidant- och anticanceraktiviteter hos extrakt av Inula helenium (L.) i den humana glioblastomcellinjen U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658–661.
4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh och A. Ghasempour, Cytotoxicitet och induktion av apoptos i bröstcancer-, hudcancer- och glioblastomceller genom växtextrakt. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131–5142.
5. Fukaya, M., et al., Cytotoxicitet hos sesquiterpenalkaloider från Nuphar-växter mot känsliga och läkemedelsresistenta cellinjer. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279–6286.