U87MG-celler – Forskning i glioblastom ved hjælp af U87MG og dens betydning for studier af hjernekræft

U-87 MG, den humane primære glioblastomcellelinje, anvendes i vid udstrækning inden for biologisk forskning. Disse celler anvendes især inden for neurovidenskab og immuno-onkologi.

Generelle karakteristika og oprindelse af U-87 MG-cellelinjen

Dette afsnit gennemgår oprindelsen og de generelle egenskaber ved U87-cellelinjen. Du vil lære: Hvad er U-87 MG-celler? Hvor stammer U87-cellen fra? Hvad er den fulde betegnelse for U-87 MG? Hvor store er U87-celler? Hvad er morfologien for U87-cellelinjen?

• U87-cellelinjen er en glioblastom- og astrocytom-cellelinje. Den blev etableret i 1966 ved Uppsala Universitet. Cellerne stammer fra en 44-årig kaukasisk mand, der led af glioblastom. Denne cellelinje kaldes formelt U 87 MG, hvilket står for Uppsala 87 Malignant Glioma.
• U 87 MG-celler har en epitelcellelignende morfologi.
• Størrelsen på U 87 MG-celler varierer mellem 12 og 14 µm i diameter.
• Denne humane glioblastomcellelinje er hypodiploid og har et modalt kromosomantal på 44 i ca. 48 % af cellepopulationen. Der findes dog også højere ploidier i 5,9 % af cellepopulationen.

Medicinsk 3D-animation, der forklarer, hvordan tumorer opstår fra astrocytter.

Oplysninger om dyrkning af U-87 MG-celler

Inden du arbejder med U 87 MG-celler, bør du sætte dig ind i følgende nøglepunkter vedrørende dyrkning af disse glioblastomceller. Du bør især vide: Hvad er populationens fordoblingstid for U 87 MG-celler? Hvilket dyrkningsmedium anvendes til dyrkning af U87-celler? Hvad er udsåningstætheden for U-87 MG-cellelinjen?

Vigtige punkter ved dyrkning af U-87 MG-celler

Populationsfordoblingstid:

U 87 MG-celler har en fordoblingstid på mellem 18 og 38 timer.

Adhærent eller i suspension:

U 87 MG er en adhærent cellelinje. Cellerne har en aflang form og vokser som monolag.

Udsåningstæthed:

Det anbefales at udså glioblastomcellelinjen U 87 MG med en celletæthed på 1 x 10⁴ celler/cm². Adhærente U87-celler vaskes med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-opløsning. Derefter centrifugeres de dissocierede celler og opsamles. Cellerne resuspenderes omhyggeligt og overføres til nye kolber indeholdende vækstmedium.

Vækstmedium:

U 87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsat 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-opløsning. Mediet bør udskiftes hver 2. til 3. dag.

Vækstbetingelser:

U-87 MG-celler kræver en befugtet inkubator med 5 % CO₂-tilførsel og en temperatur på 37 °C for optimal vækst.

Opbevaring:

U87-cellerne opbevares enten i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C for at opretholde glioblastomcellernes maksimale levedygtighed.

Fryseproces og medium:

CM-1- eller CM-ACF-frysemedier er egnede til nedfrysning af U87 MG-celler. En langsom nedfrysningsproces anbefales, da den forhindrer cellerne i at få et chok og beskytter cellernes levedygtighed.

Optøningsproces:

Frosne hætteglas med U-87 MG-cellelinjen optøs i et vandbad ved 37 °C. Cellerne tilsættes vækstmedium, resuspenderes og overføres til dyrkning i nye kolber. Alternativt kan U87-cellerne centrifugeres for at fjerne frysemediet og derefter dyrkes.

Biosikkerhedsniveau:

Der kræves biosikkerhedsniveau 1 ved håndtering af U 87 MG-cellekulturer.

U-87 MG-celler set under mikroskopet med 10x og 20x forstørrelse.

Fordele og ulemper ved U-87 MG-celler

Når vi tænker på en cellelinje, er det første, der falder os ind: Hvad er fordelene ved at bruge U-87 MG-celler? Hvad er ulemperne ved U-87-celler?

Fordele

U-87 MG-cellelinjer anvendes i vid udstrækning inden for forskning. Nogle af fordelene ved denne cellelinje er:

Fordele

• Let at dyrke: U-87 MG-celler er lette at opretholde i kultur. De stiller ikke krævende eller komplicerede krav til cellekultivering.
• Homogenitet: U-87 MG er en homogen cellelinje. De fleste celler i en population har samme genetiske sammensætning og deler derfor lignende egenskaber. Disse celler anvendes til at studere celleprocesser, lægemiddelscreening og testning.
• Velkarakteriseret: Denne glioblastomcellelinje er velkarakteriseret med hensyn til vækstkarakteristika, morfologi og genekspression, hvilket gør den til et værdifuldt forskningsværktøj.

Ulemper

• Begrænset anvendelighed: U-87 MG er en glioblastomcellelinje, så dens anvendelsesmuligheder er primært begrænset til undersøgelse af glioblastomer og de underliggende molekylære mekanismer. Den er muligvis ikke egnet til undersøgelse af andre kræfttyper.

Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler

U87MG-glioblastomcellelinjen anvendes i vid udstrækning i kræftstudier, især inden for glioblastomforskning. Nogle af forskningsanvendelserne af U 87 MG-celler er:

• Forskning i kræftbiologi: U87-cellelinjen anvendes til at undersøge kræfts vækst og udvikling, de underliggende molekylære mekanismer, signalveje og tumorens mikromiljø. I en undersøgelse offentliggjort i 2020 blev der anvendt en in vitro-model for glioblastom, U-87 MG-cellelinjen, til at undersøge BMAL1-genet (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som et terapeutisk mål. Resultaterne viste, at BMAL1-genet hæmmer glioblastomcellers proliferation, migration og invasion ved at undertrykke genekspressionen af cyclin B1, metalloproteinase-9 og phospho-AKT [1]. En anden undersøgelse, der blev gennemført i 2019, anvendte U87-cellelinjen og viste, at nedreguleret ekspression af transkriptionsfaktoren lipopolysaccharid-induceret tumornekrosefaktor-alfa (LITAF) kan øge gliomcellers strålefølsomhed gennem opregulering af FOXO-1-signalvejen. LITAF er også kendt som p53-induceret gen 7 (PIG7) [2].
• Lægemiddelforskning og -udvikling: U-87 MG-celler kan anvendes til screening og testning af lægemidler, hvilket giver forskere mulighed for at identificere nye potentielle kræftlægemidler og vurdere deres effektivitet og toksicitet. I en undersøgelse blev U-87-MG-glioblastomcellelinjen anvendt til at evaluere det kræftbekæmpende og antioxidante potentiale samt de antioxidante og kræftbekæmpende egenskaber ved Inula helenium (L.)-ekstrakt [3]. Tilsvarende nævnte en anden publikation brugen af U-87-cellelinjen til at teste den cytotoksiske og apoptotiske virkning af planteekstrakter [4]. Desuden undersøgte en undersøgelse, der blev offentliggjort i 2018, den cytotoksiske virkning af sesquiterpenalkaloider udvundet af Nuphar-planter på følsomme og lægemiddelresistente U-87-MG-cellelinjer [5].

Bestil din U87 MG-gliomcellelinje i dag

U-87 MG-cellelinje: Forskningspublikationer

Her er nogle fremtrædende forskningspublikationer, der omhandler U-87 MG-cellelinjen.

Hypoxi øger migrationen og invasionen af humane glioblastom-U87-celler gennem PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvejen

Denne artikel, der blev offentliggjort i Neuroreport i 2018, fremsatte den hypotese, at hypoxi kan øge migrationen og invasionen af humane glioblastom-U87-celler ved at regulere PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvejen.

Eriodictyol hæmmer proliferation og metastase og inducerer apoptose i gliomceller via PI3K/Akt/NF-κB-signalvejen

Denne undersøgelse blev offentliggjort i tidsskriftet *Frontiers in Pharmacology* i 2020. Forskningsresultaterne viser, at et flavonoid, Eriodictyol, udøver kræftbekæmpende virkninger på U87-cellelinjen og hæmmer celleproliferation og metastase. Forbindelsen udøver sine antitumoregenskaber ved at modulere PI3K/Akt/NF-κB-signalvejen.

Xihuang-pillen inducerer apoptose i humane glioblastom-U-87 MG-celler ved at målrette sig mod den ROS-medierede Akt/mTOR/FOXO1-signalvejen

Denne forskning, offentliggjort i *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2018), tyder på, at en kinesisk urteformel kaldet Xihuang-pillen kan fremkalde apoptose i U87-celler ved at påvirke den ROS-aktiverede Akt/mTOR/FOXO1-kaskade.

LITAF øger strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-signalvejen

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i tidsskriftet *Cellular and Molecular Neurobiology* i 2019. Undersøgelsen foreslog, at en transkriptionsfaktor, LITAF, nedregulerer og øger strålefølsomheden hos gliomceller ved at regulere FOXO-1-signalvejen.

Fremstilling af curcumin-ladede PLGA-nanopartikler og undersøgelse af deres cytotoksiske virkninger på humane glioblastom-U87MG-celler

Denne artikel blev offentliggjort i tidsskriftet *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). Forskerne anvendte U87MG-celler til at undersøge den cytotoksiske virkning af curcumin-ladede PLGA-nanopartikler.

Ressourcer til U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mere

U87MG-glioblastomcellelinjen anvendes i mange kræftforskningslaboratorier. Her er nogle ressourcer vedrørende denne cellelinje:

• Transfektion af U87-cellelinjen: Dette dokument beskriver en transfektionsprotokol for U87MG-celler.
• Transfektion af U 87 MG-cellelinjen: Denne video er en vejledning, der trin for trin forklarer transfektionsprotokollen for U87-celler.

Ressourcerne til cellekulturprotokollen for U87-celler er angivet nedenfor:

• U87MG-celler: Dette link indeholder grundlæggende oplysninger om U87MG-cellelinjen. Det omfatter korte protokoller for celledeling, nedfrysning og optøning af celler.

Indsigt i U87 MG-gliomforskning: Ofte stillede spørgsmål

Referencer

1. Gwon, D.H., et al., BMAL1 hæmmer proliferation, migration og invasion af U87MG-celler ved at nedregulere cyclin B1, phospho-AKT og metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
2. Huang, C., et al., LITAF øger strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-signalvejen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871-882.
3. Koc, K., et al., Antioxidant- og antikræftvirkninger af ekstrakt af Inula helenium (L.) i den humane U-87 MG-glioblastomcellelinje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658-661.
4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh og A. Ghasempour, Cytotoksicitet og induktion af apoptose i brystkræft-, hudkræft- og glioblastomceller ved hjælp af planteekstrakter. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131-5142.
5. Fukaya, M. m.fl., Cytotoksicitet af sesquiterpenalkaloider fra Nuphar-planter over for følsomme og lægemiddelresistente cellelinjer. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279-6286.