Celice U87MG – Raziskave glioblastoma z uporabo celic U87MG in njihov vpliv na študije raka na možganih

U-87 MG, celična linija primarnega človeškega glioblastoma, se pogosto uporablja v bioloških raziskavah. Te celice se zlasti uporabljajo na področjih nevroznanosti in imunoonkologije.

Splošne značilnosti in izvor celične linije U-87 MG

V tem poglavju bomo obravnavali izvor in splošne značilnosti celične linije U87. Izvedeli boste: Kaj so celice U-87 MG? Od kod izvirajo celice U87? Kaj pomeni kratica U-87 MG? Kako velike so celice U87? Kakšna je morfologija celične linije U87?

• Celična linija U87 je celična linija glioblastoma, astrocitoma. Ustanovljena je bila leta 1966 na Univerzi v Uppsali. Celice so bile pridobljene od 44-letnega belca, ki je trpel za glioblastomom. Ta celična linija se uradno imenuje U 87 MG, kar pomeni Uppsala 87 Malignant Glioma.
• Celice U 87 MG imajo morfologijo, podobno epitelijskim celicam.
• Premer celic U 87 MG znaša med 12 in 14 µm.
• Ta človeška celična linija glioblastoma je hipodiploida in ima modalno število kromosomov 44 v približno 48 % celične populacije. Vendar pa višje ploidije obstajajo tudi v 5,9 % celične populacije.

Medicinska 3D-animacija, ki pojasnjuje nastanek tumorjev iz astrocitov.

Podatki o gojenju celic U-87 MG

Preden začnete delati z celicami U 87 MG, se morate seznaniti z naslednjimi ključnimi točkami za gojenje teh glioblastomskih celic. Zlasti morate vedeti: Kakšen je čas podvojitve populacije celic U 87 MG? Kateri gojišča se uporabljajo za gojenje celic U87? Kakšna je gostota posejanja celične linije U-87 MG?

Ključne točke za gojenje celic U-87 MG

Čas podvojitve populacije:

Čas podvojitve populacije celic U 87 MG znaša od 18 do 38 ur.

Adhezivne ali v suspenziji:

U 87 MG je adhezivna celična linija. Celice imajo podolgovato obliko in rastejo v monoslojih.

Gostota posevka:

Za celično linijo glioblastoma U 87 MG se priporoča sejanje pri gostoti 1 x 10^⁴ celic/cm². Adherentne celice U87 se operejo z 1× PBS in inkubirajo z raztopino Accutase. Nato se disociirane celice centrifugirajo in izolirajo. Celice se previdno ponovno suspendirajo in dodajo v nove kolbe, ki vsebujejo rastno gojišče.

Rastno gojišče:

Celična linija U 87 MG se goji v EMEM (Eagle's minimal essential medium), obogatenem z 1,0 g/L L-glukoze, 2,0 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natrijevega piruvata in 10 % raztopine FBS. Gojišče je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni.

Pogoji rasti:

Celice U-87 MG za optimalno rast potrebujejo vlažen inkubator z dovodom 5 % CO₂ in temperaturo 37 °C.

Shranjevanje:

Celice U87 se hranijo bodisi v plinski fazi tekočega dušika bodisi pri temperaturi pod -150 °C, da se ohrani največja vitalnost celic glioblastoma.

Postopek zamrzovanja in gojišče:

Za zamrzovanje celic U 87 MG sta primerna zamrzovalna gojišča CM-1 ali CM-ACF. Priporoča se počasen postopek zamrzovanja, saj preprečuje šok celic in ohranja njihovo vitalnost.

Postopek odmrzovanja:

Zamrznjene viale z celicami linije U-87 MG se odmrzujejo v vodni kopeli pri 37 °C. Celicam se doda gojišče, ponovno se suspendirajo in razporedijo v nove kolbe za gojenje. Nasprotno pa se celice U87 lahko centrifugirajo, da se odstrani sredstvo za zamrzovanje, nato pa se gojijo.

Raven biološke varnosti:

Za ravnanje s celičnimi kulturami U 87 MG je potrebna stopnja biološke varnosti 1.

Celice U-87 MG pod mikroskopom s 10-kratno in 20-kratno povečavo.

Prednosti in slabosti celic U-87 MG

Ko pomislimo na celično linijo, se nam najprej poraja vprašanje: Katere so prednosti uporabe celic U-87 MG? Katere so slabosti celic U-87 MG?

Prednosti

Celične linije U-87 MG se široko uporabljajo v raziskavah. Nekaj prednosti, povezanih s to celično linijo, so:

Prednosti

• Enostavna gojitev: Celice U-87 MG je enostavno gojiti v kulturi. Njihova gojitev ne zahteva posebnih ali zapletenih pogojev.
• Homogenost: U-87 MG je homogena celična linija. Večina celic v populaciji ima enako genetsko sestavo in zato podobne lastnosti. Te celice se uporabljajo za preučevanje celičnih procesov, presejanje zdravil in testiranje.
• Dobro opredeljena: Ta celična linija glioblastoma je dobro opredeljena glede na značilnosti rasti, morfologijo in gensko ekspresijo, kar jo naredi za dragoceno raziskovalno orodje.

Pomanjkljivosti

• Omejena uporabnost: U-87 MG je celična linija glioblastoma, zato je njena uporaba omejena predvsem na preučevanje glioblastomov in njihovih molekularnih mehanizmov. Morda ni primerna za preučevanje drugih vrst raka.

Raziskovalne aplikacije s celicami U-87 MG

Celična linija glioblastoma U87MG se obsežno uporablja v raziskavah raka, zlasti v raziskavah glioblastoma. Nekatere raziskovalne uporabe celic U 87 MG so:

• Raziskave biologije raka: Celična linija U87 se uporablja za preučevanje rasti in razvoja raka, osnovnih molekularnih mehanizmov, signalnih poti in mikrookolja tumorja. V študiji, objavljeni leta 2020, so uporabili in vitro model glioblastoma, celično linijo U-87 MG, za preučevanje gena BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) kot terapevtskega cilja. Ugotovitve so pokazale, da gen BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic glioblastoma s preprečevanjem izražanja genov ciklina B1, metaloproteinaze-9 in fosfo-AKT [1]. Druga raziskava, izvedena leta 2019, je uporabila celično linijo U87 in ugotovila, da lahko zmanjšana ekspresija transkripcijskega faktorja LITAF (lipopolisaharid-inducirani tumor nekrotični faktor alfa), ki ga inducira lipopolisaharid, poveča radiosenzitivnost gliomskih celic prek povečane ekspresije poti FOXO-1. LITAF je znan tudi kot p53-inducirani gen 7 (PIG7) [2].
• Odkrivanje in razvoj zdravil: Celice U-87 MG se lahko uporabljajo za presejanje in testiranje zdravil, kar raziskovalcem omogoča, da identificirajo nova potencialna zdravila proti raku ter ocenijo njihovo učinkovitost in toksičnost. V raziskavi so uporabili celično linijo glioblastoma U 87 MG za oceno protirakovnega in antioksidativnega potenciala ter protirakovnih in antioksidativnih lastnosti izvlečka Inula helenium (L.) [3]. Podobno je druga publikacija omenila uporabo celične linije U87 za testiranje citotoksičnega in apoptotičnega učinka rastlinskih izvlečkov [4]. Poleg tega je raziskava, objavljena leta 2018, preučevala citotoksični učinek seskviterpennih alkaloidov, ekstrahiranih iz rastlin rodu Nuphar, na občutljive in na zdravila odporne celične linije U-87 MG [5].

Naročite si celično linijo U87 MG glioma še danes

Celična linija U-87 MG: Raziskovalne publikacije

Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki obravnavajo celično linijo U 87 MG.

Hipoksija poveča migracijo in invazijo celic človeškega glioblastoma U87 prek signalne poti PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α

Ta članek, objavljen v reviji Neuroreport leta 2018, predlaga, da bi hipoksija lahko povečala migracijo in invazijo človeških glioblastomskih celic z regulacijo signalne poti PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.

Eriodiktol zavira proliferacijo in metastaziranje ter inducira apoptozo celic glioma prek signalne poti PI3K/Akt/NF-κB

Ta študija je bila objavljena v reviji »Frontiers in Pharmacology« leta 2020. Rezultati raziskave kažejo, da flavonoid eriodiktiool deluje protirakovo na celično linijo U87 ter zavira celično proliferacijo in metastaziranje. Ta spojina izraža svoje protitumorske lastnosti z moduliranjem signalne poti PI3K/Akt/NF-κB.

Tableta Xihuang inducira apoptozo celic človeškega glioblastoma U-87 MG prek ciljanja poti Akt/mTOR/FOXO1, ki jo posredujejo reaktivne kisikove vrste (ROS)

Ta raziskava, objavljena v reviji »Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine« (2018), kaže, da lahko kitajska zeliščna formula, imenovana tabletka Xihuang, inducira apoptozo v celicah U87 z delovanjem na kaskado Akt/mTOR/FOXO1, ki jo aktivirajo ROS.

LITAF poveča radiosenzitivnost človeških gliomskih celic prek poti FoxO1

Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji »Cellular and Molecular Neurobiology« leta 2019. Študija je pokazala, da transkripcijski faktor LITAF z regulacijo signalne poti FOXO-1 zavira delovanje in poveča radiosenzitivnost celic glioma.

Priprava nanodelcev PLGA, obogatenih s kurkuminom, in preučevanje njihovih citotoksičnih učinkov na človeške glioblastomske celice U87MG

Ta članek je bil objavljen v reviji Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Raziskovalci so uporabili celice U87MG za preučevanje citotoksičnega učinka nanodelcev PLGA, obogatenih s kurkuminom.

Viri za celice U-87 MG: protokoli, videoposnetki in več

Celična linija glioblastoma U87MG se uporablja v številnih raziskovalnih laboratorijih za raziskave raka. Nekaj virov, ki obravnavajo to celično linijo, so:

• Transfekcija celične linije U87: Ta dokument opisuje protokol transfekcije za celice U87MG.
• Transfekcija celične linije U 87 MG: Ta videoposnetek je navodilo, ki korak za korakom pojasnjuje protokol transfekcije celic U87.

Viri za protokol gojenja celic U87 so navedeni spodaj:

• Celice U87 MG: Ta povezava vsebuje osnovne informacije o celični liniji U87 MG. Vključuje kratke protokole za delitev, zamrzovanje in odmrzovanje celic.

Vpogled v raziskave glioma U87 MG: Pogosto zastavljena vprašanja

Viri

1. Gwon, D.H. in sod., BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic U87MG z zmanjšanjem izražanja ciklina B1, fosfo-AKT in metaloproteinaze-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
2. Huang, C., et al., LITAF poveča občutljivost človeških gliomskih celic na sevanje prek poti FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): str. 871–882.
3. Koc, K., et al., antioksidativne in protirakave lastnosti izvlečka Inula helenium (L.) v človeški celični liniji glioblastoma U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): str. 658–661.
4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh in A. Ghasempour, Citotoksičnost in indukcija apoptoze v celicah raka dojke, kožnega raka in glioblastoma z rastlinskimi izvlečki. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): str. 5131–5142.
5. Fukaya, M. in sod., Citotoksičnost seskviterpennih alkaloidov iz rastlin rodu Nuphar na občutljive in na zdravila odporne celične linije. Food Funct, 2018. 9(12): str. 6279–6286.