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MR1
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

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MR1

Cell line · Product number 305000

MR1 is a hybridoma cell line derived from the fusion of spleen cells with NS-1 myeloma cells, following the immunization of animals with mouse T cells, pa...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

MR1 es una línea celular de hibridoma derivada de la fusión de células del bazo con células de mieloma NS-1, tras la inmunización de animales con células T de ratón, en particular del subtipo Th1. Estas células expresan inmunoglobulina, específicamente anticuerpos monoclonales dirigidos contra el ligando de CD40 de ratón (CD154, también conocido como gp39 o CD40L). El isotipo del anticuerpo monoclonal producido es IgG. El CD154 es una molécula crucial que participa en las interacciones de las células T, especialmente en la activación de las células B, ya que su unión al CD40 en las células B es esencial para la proliferación, la diferenciación y la producción de inmunoglobulina de estas últimas. Esta unión también influye en la coestimulación de las células T y en la producción de citocinas, lo que convierte al CD154 en un objetivo importante para la intervención terapéutica en la modulación inmunológica.

Los anticuerpos derivados de MR1 se dirigen específicamente a la interacción entre CD154 y CD40 y la bloquean, lo que tiene implicaciones terapéuticas en diversas respuestas inmunitarias. Cabe destacar que los anticuerpos anti-CD154 se han utilizado para inducir la falta de respuesta de las células T ante los injertos de órganos en los trasplantes. Al bloquear la interacción CD154-CD40, los anticuerpos MR1 inhiben la activación de las células T y la respuesta inmunitaria asociada, promoviendo un estado de tolerancia. Esta estrategia es particularmente valiosa para prevenir el rechazo de órganos en receptores de trasplantes, ya que permite la supervivencia a largo plazo del injerto sin la necesidad de inmunosupresores sistémicos, los cuales pueden tener efectos secundarios graves. En modelos experimentales, los anticuerpos contra MR1 han demostrado la capacidad de prolongar la supervivencia del injerto de islotes pancreáticos, lo cual es significativo en el tratamiento de la diabetes mediante el trasplante de islotes.

Los anticuerpos MR1 también se utilizan en investigaciones relacionadas con enfermedades autoinmunes, en las que la activación inapropiada de las células T y B a través de las interacciones CD40-CD154 desempeña un papel fundamental. Al inhibir estas interacciones, los anticuerpos MR1 pueden ayudar a modular las respuestas inmunitarias, lo que los convierte en candidatos potenciales para aplicaciones terapéuticas más allá de los trasplantes, incluyendo afecciones autoinmunes y ciertos trastornos linfoproliferativos. La literatura de investigación y de patentes ha explorado el uso de MR1 en diversas aplicaciones, lo que subraya su relevancia en el campo de la regulación inmunitaria y el desarrollo de anticuerpos terapéuticos.

02Classification

Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Linfoblasto

04Identifiers

Citation
MR1 (número de catálogo de Cytion 305000)
NCBI TaxID
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Expression and susceptibility

Protein expression
Inmunoglobulina, anticuerpo monoclonal, contra el ligando de CD40 de ratón (CD154, CD40L, gp39)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS y 0,05 mM de 2-mercaptoetanol
Subculturing
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando de arriba hacia abajo; luego, tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión con medio de cultivo fresco hasta alcanzar una concentración celular de 1 × 10⁵ células/ml, y divida la suspensión ajustada en alícuotas en matraces nuevos para continuar con el cultivo.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.